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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
自由醛基清除液 | 500ml | FS-R7168 |
產品分類:染色其他
儲存條件:4℃,12個月
用途:洗脫電鏡固定液的緩沖液,用于清洗固定后的標本,出去殘留的自由醛基。標本經醛類固定劑固定后一般都殘留有自由醛基,這種自由醛基比較活潑,可與各種抗體的氨基結合,導致難以清除的非特異性染色,因此標本固定后必須*清洗干凈。
注意事項:由PBS、甘氨酸等組成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
冷溫木克酵母磷化表皮生長因子受體抗體Human KLKB1 (Plasma kallikrein) ELISA KIT人16α羥基雌1(16-α OHE-1)免疫試劑盒
氏蜜環菌磷化埃茲蛋白抗體Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA Kit人15-羥基前列腺脫氫(15-PGDH)免疫試劑盒
菊異莖點霉磷化埃茲蛋白抗體Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KIT人15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)免疫試劑盒
白色金針菇磷化轉錄因子ELK1抗體Human HCRTR2 (Orexin receptor type 2) ELISA KIT人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫試劑盒
雞傷菌磷化酪蛋白激A2受體抗體Human IL1F10(Interleukin-1 family member 10) ELISA Kit人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)免疫試劑盒
深紅Ephrin B抗體Human ISLR (Immunoglobulin superfamily containing leucine-rich repeat protein) ELISA KIT人12羥二十烷四烯(12-HETE)免疫試劑盒
尖孢鐮孢磷化Ephrin B抗體Human IGFN1 (Immunoglobulin-like and fibronectin type III domain-containing protein 1) ELISA KIT人11-脫氧皮質免疫試劑盒
茶藨子葡萄座腔菌磷化Ephrin B抗體Human ADRA1A(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化Ephrin B抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit人11β羥類固脫氫1型(11β-HSD1)免疫試劑盒
奇異鏈霉菌磷化Ephrin B抗體Human ICOSLG (ICOS ligand) ELISA KIT人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬磷化雌激受體α抗體Human Anti-M3 AChR (Anti-M3 Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人1,4,5-三磷肌(IP3)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化雌激受體α抗體Human IKBIP (Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase-interacting protein) ELISA KIT人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)免疫試劑盒
球孢白僵菌表皮生長因子受體底物8抗體Human HAGHL (Hydroxyacylglutathione hydrolase-like protein) ELISA KIT人1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒
灰黃淺黃酵母內皮1抗體Human HYLS1 (Hydrolethalus syndrome protein 1 homolog) ELISA KIT人 Liprin alpha 1 免疫試劑盒
瘡痂病鏈霉菌腸道病71型/手足口病病抗體Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) ELISA KIT人 KIAA1199 免疫試劑盒
Corynebacterium sp.絲裂原活化蛋白激1抗體Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) ELISA KIT犬
副豬嗜血桿菌Parasuis│Haemophilus 質量規格:分析標準品,98.5%棕櫚酯
羅氏擬盤多毛孢Pestalotiopsis│lespedezae 質量規格:分析標準品,98%異香蘭
黃柄曲霉Aspergillus│flavipes 質量規格:分析標準品,99.5%蔗糖
自由醛基清除液Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人Ⅷ相關抗原規格: 48T
Human coagulation factor IX ,F IX ELISA Kit 人Ⅸ規格: 48T
Human coagulation factor X ,F X ELISA Kit 人Ⅹ規格: 48T
Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉su輔因子規格: 48T
Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 人纖溶mei抗纖溶mei復合物規格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。