詳細介紹
產品分類:培養基
儲存條件 4℃,12個月
用途 轉化的熱激處理后恢復培養
注意事項 主要由高濃度胰蛋白胨、酵母提取物、低濃度氯化鈉、葡萄糖、瓊脂等組成。粉劑溶解于水后,如要求無菌,應過濾除菌。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
SOC固體培養基粉劑 | 1L | FS-R6415 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
纖維蛋白原α(FGα)FGα ELISA Kit7號染色體開放閱讀框65抗體包裝0.5mg
纖維蛋白原(FG)FG ELISA Kit基轉移cyt-19抗體包裝1g
纖溶抑制因子(TAFI)TAFI ELISA Kit單核趨化蛋白4抗體包裝25g
纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)PAI2 ELISA KitCD34抗體包裝5g
纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)PAI1 ELISA Kit白共同抗原抗體包裝1g
夏科雷登氏結晶蛋白(CLC)CLC ELISA Kit磷化反應元件調節蛋白抗體包裝5g
細胞周期D3(CCND3)CCND3 ELISA Kit間隙連接蛋白37抗體包裝1g
細胞周期D2(CCND2)CCND2 ELISA Kit2型補體受體抗體包裝5g
細胞周期D1(CCND1)CCND1 ELISA Kit唾液轉移1/α-2,6唾液轉移抗體包裝1g
細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS3)SOCS3 ELISA Kit碳酐9抗體包裝5g
細胞外信號調節激2(ERK2)ERK2 ELISA Kit色P450 17抗體包裝100g
細胞外基質磷糖蛋白(MEPE)MEPE ELISA Kit色P450 7A1抗體/膽固7a羥化包裝25g
細胞外基質蛋白1(ECM1)ECM1 ELISA Kit膽固24羥化抗體包裝500g
P450家族成員7A1(CYP7A1)CYP7A1 ELISA Kit腫瘤新因子1抗體包裝5g
P450家族成員3A4(CYP3A4)CYP3A4 ELISA Kit膽固25α7羥化抗體包裝1g
球形節桿菌Arthrobacter│globiformis 質量規格:含量> 99%組織蛋白去乙酰化試劑盒抗狀腺球蛋白抗體
黃曲霉Aspergillus│flavus 質量規格:HPLC>98%,標準品組織蛋白S試劑盒乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)國家參
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98%,BR組織蛋白L1試劑盒腸道病71型IgM抗體國家參考品
SOC固體培養基粉劑GAPDH(human)/FITC 熒光標記3-甘油脫氫(人)IgG2-酰吡 ≥99%,FG,FCC
GAPDH(rat、mouse)/FITC 熒光標記3-甘油脫氫(大鼠、小鼠)IgG對氧芐酯 98%
GAPDH/FITC 熒光標記3-甘油脫氫IgG對氧芐酯 97%,FCC
GAPDH/FITC 熒光標記3-甘油脫氫IgG3-酰氧-2-丁酮 98%
Gastrin/FITC 熒光標記胃泌/蛙皮IgG4-酰氧-2, 5-二 -3-呋喃酮 98%
Gastrin/FITC 熒光標記胃泌/蛙皮IgG黑胡椒油 食品級
Brs3/Bombesin Receptor 3/FITC 熒光標記蛙皮受體3IgG布枯油 natural, FG
GATA-3/FITC 熒光標記抗GATA結合蛋白3IgG桂油 FCC