TB固體培養基粉劑公司正在銷售的產品：兔滑行蛋白β(TXLNb)試劑盒Anti-CD5 Antibody磷酸化心臟磷蛋白抗體
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兔八聚體結合轉錄因子4(OCT4)試劑盒Anti-Cd59 Antibody26S蛋白酶調節亞型p55抗體
兔抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)試劑盒Anti-CD58

產品分類：培養基

儲存條件  室溫,24個月

用途  質粒制備、蛋白質表達

注意事項  主要由胰蛋白胨和酵母提取物、磷酸鹽、瓊脂組成。如要求無菌,可高壓滅菌15～20min。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

P450家族成員2E1(CYP2E1)CYP2E1 ELISA Kit角蛋白3+12抗體包裝5g

P450家族成員2B6(CYP2B6)CYP2B6 ELISA Kit接頭蛋白CrkL抗體包裝100g

P450家族成員27B1(CYP27B1)CYP27B1 ELISA Kit色P450 24A1抗體包裝25g

C氧化亞基Ⅲ(COX3)COX3 ELISA Kit色P450 2R1抗體包裝25g

C(CYCS)CYCS ELISA Kit銅代謝結構域蛋白10抗體包裝1g

細胞間粘附分子5(ICAM5)ICAM5 ELISA Kit鈣周期結合蛋白抗體包裝5g

細胞間粘附分子2(ICAM2)ICAM2 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框69抗體包裝100g

細胞間粘附分子1(ICAM1)ICAM1 ELISA Kit銅代謝結構域蛋白3抗體包裝25g

細胞骨架活性調節蛋白(ARC)ARC ELISA Kit19號染色體開放閱讀框71抗體包裝5g

細胞分裂周期因子25(CDC25)CDC25 ELISA Kit異染色體同源蛋白1抗體包裝25g

細胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)PDCD1LG1 ELISA Kit銅代謝結構域蛋白8抗體包裝5g

硒蛋白P1(SEPP1)SEPP1 ELISA Kit霉抗體包裝1g

無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)WNT5A ELISA Kit4號染色體開放閱讀款包裝250mg

無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)WNT3A ELISA Kit凋亡加強結構域蛋白11抗體包裝5g

無翅型MMTV整合位點家族成員10B(WNT10B)WNT10B ELISA Kit色B抗體包裝25g

小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質量規格：>99%,USP組織蛋白K試劑盒戊型肝炎病IgG抗體國家參考品

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：HPLC>98%,標準品組織蛋白H試劑盒巨病（CMV)IgM抗體國家參考品

平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質量規格：>99%,超純組織蛋白G自身抗體試劑盒型肝炎病抗體快速檢測試劑國家參考品
TB固體培養基粉劑GATA-4/FITC  熒光標記抗GATA結合蛋白4IgG小豆蔻油 FCC

GATA-5/FITC  熒光標記抗GATA結合蛋白5IgGL-香芹 97%

GATA-6/FITC  熒光標記抗GATA結合蛋白6IgGL-香芹 95%,FG

Gax/FITC  熒光標記生長終止特異性同源盒因IgG杉葉油 natural

GCK/FITC  熒光標記抗葡萄糖激IgG(+)-二氫香芹酮 98%

GCN2/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白IgG順式二氫香芹酮 97%

Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白IgG二氫香芹脂 98%

phospho-GCN2 (Thr667) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白IgG3,4-二-1,2-環戊二酮 97%