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產品分類：培養基

儲存條件  4℃,6個月

用途  保存細菌的培養基

注意事項  無菌溶液。主要由LB培養基、硫酸銨、甘油等組成,經過濾除菌處理。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

組織金屬蛋白抑制因子2(TIMP2)TIMP2 ELISA Kit磷化Bax抗體包裝250mg

組織金屬蛋白抑制因子1(TIMP1)TIMP1 ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝25ml

組織蛋白Z(CTSZ)CTSZ ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝5ml

組織蛋白S(CTSS)CTSS ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝1g

組織蛋白L(CTSL)CTSL ELISA Kit磷化相關死亡促進因子抗體包裝5g

組織蛋白K(CTSK)CTSK ELISA Kit肌動蛋白樣蛋白6A抗體包裝100g

組織蛋白G(CTSG)CTSG ELISA Kit磷化紅陰離子交換蛋白1抗體包裝25g

組織蛋白D(CTSD)CTSD ELISA Kit磷化紅陰離子交換蛋白1抗體包裝5g

組織蛋白A(CTSA)CTSA ELISA Kit障礙自整合蛋白BAF抗體包裝200mg

組蛋白脫乙酰基4(HDAC4)HDAC4 ELISA Kit磷化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體包裝1g

組蛋白脫乙酰基2(HDAC2)HDAC2 ELISA Kit磷化轉錄因子MYB相關蛋白B抗體包裝1g

組蛋白脫乙酰基1(HDAC1)HDAC1 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝250mg

組蛋白H4(H4)H4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g

組蛋白H3(H3)H3 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝5g

組蛋白H2B(H2B)H2B ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g

二磷腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體干擾α14(IFNα14)MK 2206 dihydrochloride 是一種口服有效的 Akt 變構抑制劑，抑制 Akt1/Akt2/Akt3 的 IC50 分別為 5 nM/12
LB冷凍緩沖液factor VIII/FITC  熒光標記第八因子相關抗原IgG腺-5′-三二鈉鹽，三水 98%

factor X III /FITC  熒光標記ⅩⅢIgG三脫氧腺鈉鹽 98%

FADD/FITC  熒光標記Fas死亡結構域相關蛋白IgG三脫氧腺鈉鹽溶液 dATP,0 mM 溶液, pH 7.0

FADD/FITC  熒光標記Fas相關死亡結構域蛋白IgG胞-5'-三二鈉鹽(CTP)  95%

Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC  熒光標記兔抗小鼠化Fas相關死亡結構域蛋白IgG腺-3'，5'-環 99%

Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC  熒光標記化性成纖維生長因子受體1IgG三脫氧胞鈉鹽 98%

P-FADD/FITC  熒光標記化Fas死亡結構域相關蛋白IgG三脫氧鳥鈉鹽 98%

FAF1/FITC  熒光標記Fas相關1因子IgG2'-脫氧胸-5'-三三鈉,二水 96%