詳細介紹
商品介紹:
測定意義 DBE能夠專一性地裂解支鏈淀粉的α-1,6糖苷鍵,產生線性的葡萄糖鏈,在調整支鏈淀粉分子的鏈長方面有重要的作用。 測定原理 采用3,5-二硝基水楊酸法測定DBE催化支鏈淀粉產生的還原糖,通過測定還原糖含量的變化來計算DBE活性。 需自備的的儀器和用品 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321212 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
矮地茶(標準品)英文名: Fluorescein免疫球蛋超家族成員8抗體包裝5g
艾黃;六棱菊亭(標準品)英文名: Calcein白介33抗體包裝25g
艾葉(標準品)英文名: Wright's stain核蛋白9抗體(Ran結合蛋白M)包裝25ml
安格洛苷 C(標準品)英文名: Giemsa stain真核翻譯起始因子3A抗體包裝5ml
安石榴甙(標準品)英文名: 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester磷化真核翻譯起始因子4G抗體包裝1g
安五脂(標準品)英文名: 6-Carboxyfluorescein整合α4β7抗體包裝5g
安息香(標準品)英文名: 5-Carboxyfluorescein磷化干擾調節因子3抗體包裝10MG
澳茄新堿(標準品)英文名: Nigrosine water solubleISLR2蛋白抗體包裝1g
澳洲茄;澳州茄(標準品)英文名: Nigrosin alcohol solubleIQCG蛋白抗體包裝250mg
澳洲茄邊堿(標準品)英文名: 7-HydroxycoumarinIQCK蛋白抗體包裝1g
澳洲茄堿(標準品)英文名: HeminDNA結合抑制因子1抗體包裝250mg
八角楓(標準品)英文名: 5-Carboxyfluorescein diacetate單磷脫氫1抗體包裝25g
八角茴香(標準品)英文名: 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate干擾誘導蛋白P78抗體包裝5g
八角蓮(標準品)英文名: 5-Aminofluorescein間粘附分子5抗體包裝100g
八角麻(標準品)英文名: 6-Aminofluorescein肌單磷IMPA3抗體包裝25g
#固氮菌Azotobacter│sp. 質量規格:Mw:63000~77000,USP32類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 絞股藍皂苷XLIX;Gypenoside
微桿菌屬Microbacterium│sp. 質量規格:Mw35 000 to 45 000類似cDNA順序BC027382 絞股藍皂苷;Gynostemma Pen
猴頭菇Hericium│erinaceus 質量規格:MW:16000~24000類免疫缺陷病試劑盒5-O-基維斯阿米苷;5-O-Met
淀粉脫分支酶(DBE)測試盒50管/24樣費爾氏酵母 3,5-二溴苯甲酪羥化Elisa
釀酒酵母 甘氨酰-L-谷色C氧化Elisa
大毛霉 Ketanserin鞘氨-1-磷酸Elisa
稻田彎曲嗜酸 二甲基二烯基化鞘氨Elisa
朱黃籃狀 烯酸二環戊基酯堿性焦磷酸Elisa
膠孢 二乙氧基烷苯解氨Elisa
小孢根霉須狀變種 西他唑磺基轉移 1A1Elisa
假單胞屬 4-(二氟甲氧基)苯甲磺基轉移 2A1Elisa
新城疫病 4-Boc-氨基β-酮脂酰-CoA合Elisa
核盤 2,4,6-三苯酸β-酮脂酰-CoA合Elisa
芽胞桿 1-庚炔-3-纖維Elisa
溶淀粉類芽孢桿 叔丁氧羰基-L-谷 5-環己酯3-氧酰基-酰基載體蛋白還原Elisa
岸邊亞硫酸鹽桿 1,2-雙(基硅氧基)乙烷油體相關蛋白Elisa
樟疫霉 對氨基苯甲酰-β-末端脫氧核糖核酸轉移Elisa
深層大洋芽孢桿 泛鈉末端脫氧核糖核酸轉移Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。