化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/48樣 |
產品貨號 | AS6321246 |
商品介紹：
測定意義： 幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。 測定原理： 幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與DNS試劑反應產生棕紅色化合物，在540nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。自備實驗用品及儀器 天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（土壤樣品專用）和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
羅漢果皂苷Ⅲe英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-rU中胚層誘導早期反應蛋白2抗體包裝25g
羅漢松樹脂-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rGMDM2樣P53蛋白結合抗體包裝5g
羅通定/左旋延胡索乙/左旋四氫巴馬(標準品）英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rCRNA相關結合蛋白MCG10抗體包裝25ml
蘿卜硫；萊菔硫烷(標準品)英文名： 5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA線粒體核糖體蛋白S4抗體包裝5ml
裸花紫珠（標準品）英文名： DMT-dI緊密連接蛋白MUPP1抗體包裝25g
絡塞定（標準品）英文名： DMT-Ac-dC肌管相關蛋白14抗體包裝5g
絡塞琳（標準品）英文名： DMT-dT小腦癥基因1/認知相關蛋白抗體包裝50mg
絡塞維（標準品）英文名： DMT-dU鋅指蛋白60抗體包裝1g
絡石苷（標準品）英文名： D-(+)-Xylose 肌球蛋白6抗體包裝5g
絡石藤（標準品）英文名： D-(+)-Xylose 肌肉抗體包裝25g
絡緦（標準品）英文名： 2',3'-Dideoxyuridine代謝型谷受體-3抗體包裝5g
駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標準品)英文名： Hygromycin B促代謝型谷受體2+3抗體包裝1g
駱駝篷子（標準品）英文名： iBu-DMT-dG促代謝型谷受體1+5抗體包裝25g
落花生枝葉（標準品）英文名： Bz-DMT-dCMHC I類鏈相關蛋白A/組織相容性復合物MHCIa抗體包裝5g
落新婦苷(標準品)英文名： Bz-DMT-dA肌肉特異性環指蛋白2抗體包裝25g
蘋果鏈格孢Alternaria│mali 質量規格：>98%,進分抗類風濕關節炎核抗原抗體試劑盒3,5-O-二咖啡酰基奎寧;3,5-D
沙雷氏菌屬Serratia│sp. 質量規格：>98%,分子生物學級抗狼瘡抗凝抗體試劑盒兒茶;Cianidanol
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質量規格：>98%,BR抗蘭尼堿受體鈣釋放通道抗體二氫歐山芹當歸酯;Columbian
幾丁質酶測試盒100管/48樣小平菇（秀珍菇） 5--2-核糖體S6K蛋白激Elisa
枯草芽孢桿 (R)-(-)-1-甲氧基-2-蔗糖酵解型蛋白激1Elisa
白地霉 2--5-羥基嘧啶去乙酰化Sirtuin6Elisa
4-甲基-D-苯VEElisa
偶發貪銅 8--4-二氫色原酮脂肪酸合成Elisa
類干酪乳桿 對肉桂硬脂酰ACP脫氫Elisa
Mesorhizobium 5-氨基-3-溴苯甲Δ12脂肪酸脫氫Elisa
枯草芽孢桿 5-喹哪啶膜鐵轉運蛋白Elisa
加德那氏鏈霉 苯并-2-羧酸分支酸變位Elisa
鏈霉 (S)-2-氨基-2-環基乙酸吡咯啉-5-羧酸還原Elisa
綠梭鏈孢 2,5-二硫脲3-磷酸甘油脫氫Elisa
束紅球 3-溴-[1,2,4]噻唑并[4,3-A]吡啶5-磷酸核糖激Elisa
墨汁鬼傘 4-苯基環己酮硫代葡萄糖苷Elisa
棗生梅奇酵母 2,4-二羥基-6-甲線粒體膜H+-ATPaseElisa
水生黃桿 3-氨基-6-溴吡-2-甲酸單脫氫抗壞血酸還原Elisa
化工儀器網