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DNA退火緩沖液

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更新時間:2022-08-30 10:35:23瀏覽次數:525

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 1ml
貨號 FS-R7409 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7409
DNA退火緩沖液公司正在銷售的產品:Anti-RPS27L Antibody大鼠血栓素B2
Anti-RPS3 Antibody人抗磷脂酰絲抗體
Anti-RPS4Y1 Antibody人抗磷壁酸抗體
Anti-RPS6KA1 Antibody小鼠低氧誘導因子1α
Anti-RPS4X Antibody大鼠乙酰膽堿
Anti-RPS6 Antibody小鼠新生甲狀腺素
Anti-RPS6KA1 A

詳細介紹

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

DNA退火緩沖液

1ml

FS-R7409

產品分類:PCR相關

儲存條件:—20℃,12個月

用途:用于DNA oligo退火的緩沖液

注意事項:無菌溶液。主要由乙酸鉀、HEPES等組成,經無菌處理。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

粘著劍菌線粒體鈉/氫交換蛋白質2抗體Human CEBPD(CCAAT/enhancer Binding Protein(C/EBP), delta) ELISA Kit人抗紅抗體(RBC)

喇叭菌神經元1抗體Human BAX(Apoptosis regulator BAX) ELISA Kit人抗核周因子抗體(APF)

豆芽菌1-2神經肽Y抗體Human MAPK1(Mitogen-activated protein kinase 1) ELISA Kit人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)

枯草芽孢桿菌神經營養因子抗體Human CTLA4(Cytotoxic T-lymphocyte protein 4) ELISA Kit人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)

球孢白僵菌谷受體2B抗體Human CEACAM1(Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)

單胞菌屬神經纖毛蛋白2抗體Human C9(Complement component C9) ELISA Kit人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)

枯斑擬盤多毛孢谷受體2D抗體Human BCL11B(B-cell lymphoma/leukemia 11B) ELISA Kit人抗核仁抗體(ANA)

香栓孔菌原癌基因N-Ras抗體Human CCL28(C-C motif chemokine 28) ELISA Kit人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)

耐鹽考克氏菌T激活核轉錄因子4抗體Human NPS(Neuropeptide S) ELISA Kit人抗核抗體(ANA)

地下鹽單胞菌腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體Human GSK3β(Glycogen synthase kinase-3 beta) ELISA Kit人抗骨骼肌抗體(ASA)

蘇云金芽孢桿菌軸突蛋白2抗體Human CD28(T-cell-specific surface glycoprotein CD28) ELISA Kit人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)

殼菌腎小球粘附分子受體抗體Human APOA2(Apolipoprotein A-II) ELISA Kit人抗高爾基體抗體(AGAA)

變粉紅鎖擲孢酵母神經生長調節蛋白1抗體Human CD276(CD276 antigen) ELISA Kit人抗肝膜抗體(LMA)

污黑腐皮殼軸突生長誘向因子G2抗體Human CTSL2(Cathepsin L2) ELISA Kit人抗肝胞質1型抗體(LC1)

類干酪乳桿菌黑色瘤硫軟骨蛋白多糖4抗體Human COR(Cortisol) ELISA Kit人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)

NDST1蛋白抗體Human GSK3β(Glycogen synthase kinase-3 beta) ELISA Kit人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)

彎曲芽孢桿菌Bacillus│flexus 質量規格:>250U/mg,BR苦杏仁苷

芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質量規格:>2500U/MG絞股藍皂苷

雅致放射毛霉Actinomucor│elegans 質量規格:>98%,BR金絲桃
DNA退火緩沖液Alpha2-AP(Mouse Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit  小鼠α2抗纖溶mei規格: 48T

Alpha2-PI(Mouse Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit  小鼠α2纖溶mei抑制物規格: 48T

Ub(Mouse Ubiquitin) ELISA Kit  小鼠泛su蛋白規格: 48T

IDUA(Mouse Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit  小鼠αL艾杜糖suanmei規格: 48T

AlphaNAG(Mouse AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit  小鼠αN已酰氨基葡糖mei規格: 48T

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

 


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