詳細介紹
商品介紹:
測定意義: 淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程的可逆反應酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。 在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質體中,負責延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質基質中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產生葡萄糖-1-磷酸,負責葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關鍵酶。 在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。 測定原理: 淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應產生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產生NADPH,使340nm下吸光值增加。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321214 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
白花前胡A英文名: 2-Naphthol白介1受體9抗體包裝5g
白花前胡(標準品)英文名: 1-Nitroso-2-NaphtholRasGTP激活蛋白IQGAP3抗體包裝5g
白花前胡乙(標準品)英文名: Sulfochlorophenol S sodium calcium saltIroquois同源蛋白1抗體包裝100g
白花蛇舌草(標準品)英文名: 1-Naphthol跨膜蛋白BRI抗體包裝25g
白樺脂(標準品)英文名: Guaiacol跨膜蛋白ITM2C抗體包裝10g
白樺脂(標準品)英文名: NaphtholAS白介31抗體包裝1g
白樺脂(標準品)英文名: Anthrone人血清型免疫球蛋白A抗體包裝25g
白及(標準品)英文名: Thiomichler's ketoneIrx3蛋白抗體包裝5g
白蠟樹(標準品)英文名: Ninhydrin 頂端體蛋白10抗體包裝1g
白蘞(標準品)英文名: Phenidone人分泌型免疫球蛋白A包裝250mg
白麻苷英文名: ARA-AMP;Vidarabine monophosphate胰島自身抗原1抗體包裝1g
白茅根(標準品)英文名: α-Naphthoflavone胰島基因增強結合蛋白2抗體包裝25g
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標準品)英文名: Murexide白介-16抗體包裝5g
白皮杉-3'-O-葡萄糖苷英文名: Hydroxylammonium chloride離子鈣接頭蛋白抗體包裝25ml
白前(標準品)英文名: 3,3'-DimethylnaphthidineIroquois同源蛋白4抗體包裝250mg
: FERMBP3825資源名稱: 惡臭假單胞菌 質量規格:>99%,USP,Aromatase inhibitor類風濕因子試劑盒胡桃醌;
蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質量規格:>99%,標準品類風濕因子試劑盒灰氈毛忍冬皂苷;Macranthoid
諾氏菌屬菌種Nocardia│sp. 質量規格:>98%,AR類風濕因子試劑盒海藻糖;Trehalose
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒50管/48樣紅色紅曲霉 N-Boc-2,5-二氫-1H-吡咯6-磷酸果糖激Elisa
葡萄座腔 烯酸乙氧基乙氧基乙酯山梨氧化Elisa
賴芽胞桿屬 N(α)-Boc-L-2,3-二蔗糖轉運體Elisa
禾赤鐮孢 2-溴蒽糖轉運蛋白Elisa
Debaryomyces prosopidis 雙(頻哪合)二單糖轉運蛋白Elisa
土曲霉 5-溴-2-噻吩羧酸馬鈴薯病YElisa
枯草芽孢桿 甘-15N馬鈴薯病AElisa
樹舌 3--4-吡啶甲馬鈴薯病SElisa
飼料類芽孢桿 維地洛馬鈴薯病MElisa
慢生根瘤 trans-4-(4-ethylcyclohexyl)benzonitrile谷氨酰Elisa
香菇 (R)-1-Boc-3-羧基吡咯烷尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化Elisa
ATCC 700324 4,4′-二叔丁基-2,2′-聯吡啶赤霉合成Elisa
澳型核果褐腐病 氘代吡啶-d5花青Elisa
截形炭團 4,4'-二甲氧基二苯甲萘乙酸Elisa
球孢白僵 β-D-別吡喃糖赤霉8Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。