SSPE緩沖粉劑公司正在銷售的產品：Anti-RGS5 Antibody小鼠性休克綜合征素1
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Anti-RHAG Antibody人血管緊張素Ⅰ受體抗體
Anti-RHD

產品分類：核酸雜交

儲存條件：室溫,24個月

用途：雜交緩沖液

注意事項：其終濃度為：氯化鈉3M,磷酸二氫鈉0.2M、EDTA0.02M。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

短密青霉肌球蛋白輕鏈激抗體Human PICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit磷化乙酰(PaCoA)

大腸埃希氏桿菌MYCBPAP抗體Human IMPA2(Inositol monophosphatase 2) ELISA Kit磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)

香菇組織相容性復合體蛋白1抗體Human CARTPT(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript protein) ELISA Kit磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)

擴散炭層菌線粒體核糖體蛋白S22抗體Human COL1A1(Collagen Type I Alpha 1) ELISA Kit磷化外信號調節激(pERK)

毛栓孔菌棕櫚酰化膜蛋白7抗體Human PTTG2(Securin-2) ELISA Kit磷化糖原合激3β(pGSK3B)

泡囊短波單胞菌小鼠抗單克抗體Human COL2A1(Collagen alpha-1(II) chain) ELISA Kit磷化糖原合成激3(pGSK-3)

乳乳球菌乳亞種肌球蛋白輕鏈1/3抗體Human PTTG1IP(Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein) ELISA Kit磷化肌球蛋白輕鏈(PMLC)

葡萄座腔菌屬磷化肌球蛋白輕鏈抗體Human NUSAP1(Nucleolar and spindle-associated protein 1) ELISA Kit磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)

大腸埃希菌肌肉特異性泛蛋白連接1抗體Human OxLDL(Oxidized low-density lipoprotein) ELISA Kit磷化蛋白激C(P-PKC)

產氣列契瓦爾氏菌泛蛋白連接抗體Human PIIINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(III) chain) ELISA Kit磷化蛋白激B(P-PKB)

大腸埃希菌單羧轉運蛋白2抗體Human MYOCD(Myocardin) ELISA Kit磷化cAMP反應元件結合蛋白1(pCREB1)

芬青霉可溶性蘋果脫氫抗體Human NRN1(Neuritin) ELISA Kit磷甘油變位2(PGAM2)

云芝栓孔菌（變色栓菌）蛋白激C亞性D型抗體Human MITF(Microphthalmia-associated transcription factor) ELISA Kit淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)

枝孢屬磷化µ-型受體抗體Human LMAN2(Vesicular integral-membrane protein VIP36) ELISA Kit淋巴抗原6復合物基因座A(Ly6a)

鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體Human MDH2(Malate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit淋巴功能相關抗原3(LFA-3/CD58)

釀酒酵母基質金屬蛋白9抗體Human MMP17(Matrix metalloproteinase-17) ELISA Kit淋巴功能相關抗原2(LFA-2/CD2)

澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質量規格：>98%,BR鹽甜菜堿

淡紫擬青霉（新引種）Paecilomyces lilacinus 質量規格：粘度100000mPa.s甜菜堿

: SK1023/61資源名稱: 坎德沙門氏菌 質量規格：4000mPa.s,BR鼠李糖
SSPE緩沖粉劑Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit  小鼠細胞周期suD3規格： 48T

Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit  小鼠細胞周期suD2規格： 48T

E(Mouse estrogen) ELISA Kit  小鼠雌激su規格： 48T

Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit  小鼠細胞周期suD1規格： 48T

MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit  小鼠髓磷脂性蛋白規格： 48T