化工儀器網
詳細介紹
產品分類：細胞其他
儲存條件：4℃,3個月
用途：Krebs-Ringer-Phosphate-HEPES (KRPH) Buffer，含有HEPES、磷酸二氫鉀、硫suan鎂、氯化鈣、氯化鈉、氯hua鉀等，ph值為7.4。作用類似于Ringer液，用于動物離體實驗,肌體灌流、清洗組織，并維持離體組織的正常生理功能。
注意事項：無菌溶液。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
KRPH緩沖液 | 500ml | FS-R6606 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
Bullatine G（標準品） Ammomium ferric citrate肝配蛋白A1受體抗體包裝100g
Cimiracemoside Choline chloride真核翻譯起始因子2C2抗體包裝25g
Clemaphenol A D-Gluconolactone眼睛發育缺失蛋白EYA2抗體包裝500g
Clematichinenoside C Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30EYA4蛋白抗體包裝100g
Clematiunicinoside E Magnesium acetate, tetrahydrate血清反應因子輔助蛋白1抗體包裝25g
Clematomandshurica saponin ... Sodium phosphate, monobasic, monohydrate吞噬運動蛋白2抗體包裝5g
Corylifol A(標準品) Calcium gluconate, hydrate紅膜條帶4.1蛋白抗體包裝1g
Crassicauline A（標準品） N-Dodecyl-b-maltoside磷化紅生成受體抗體包裝25g
Crovatin Aminourea hydrochloride轉錄調節因子E2F7抗體包裝5g
Croverin Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml膠質谷運載蛋白4抗體包裝1g
D(十)-無葡萄糖(標準品) AcetamideerbB3結合蛋白1抗體包裝5g
D-(-)-奎寧（標準品） 1-Naphthylacetamide烯酰合1抗體包裝25g
D-阿伯糖(標準品) Iron granules烯酰合含結構域蛋白2抗體包裝5g
D-果糖（標準品） Iron(III) citrate腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體包裝1g
D-四氫藥根堿（標準品） DL-Lactic acid自身抗原EDC4抗體包裝5g
ATCC33842資源名稱: 哈氏弧菌 質量規格：>98.5%髓磷脂堿性蛋白試劑盒20(R) ;20(R)G
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：HPLC>98%,標準品髓磷脂P2蛋白試劑盒(S型)人參皂苷Rh2 ;20(S)-G
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格：>99%髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體IgG試劑盒人參皂苷Rh4;Ginsenoside
KRPH緩沖液SSB/La /FITC 熒光標記抗干燥癥SSB/LaIgG
Fut4/CD15/SSEA-1 /FITC 熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-1IgG
SSEA3/FITC 熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-3IgG
SSEA4/FITC 熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-4IgG
AKAP12/FITC 熒光標記絲氨抑制蛋白激C底物IgG
SSTR1/FITC 熒光標記生長抑受體1(SSTR1)IgG
SSTR2 /FITC 熒光標記生長抑受體2(SSTR2)IgG
SSTR3/FITC 熒光標記生長抑受體3(SSTR3)IgG
化工儀器網