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詳細介紹
商品介紹：
測定意義 磷脂酶C（EC 3.1.4.3）是一種水解甘油磷酸酯C3位點甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶，廣泛存在于微生物及動植物的組織和細胞中，在細胞代謝、細胞傳遞、生長發育等方面具有重要作用。 測定原理 磷脂酶C催化水解NPPC產生對硝基苯酚，在410nm處有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 |
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321194 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
五味子英文名： Dodecyltrimethylammonium chloride(DTAC)熱休克蛋白90α抗體包裝5g
五味子烯(標準品)英文名： CTAC肝源性纖維蛋白原相關蛋白1抗體包裝1g
五味子乙(標準品)英文名： Stearyl Trimethyl Ammoium Chloride(STAC)紅分化相關基因蛋白抗體包裝5g
五味子酯(標準品)英文名： Decyltrimethylammonium chloride同源異型盒基因HOXA13抗體包裝1g
五味子酯戊英文名： Trimethyloctylammonium chloride 磷化組蛋白去乙酰化4(Ser246)抗體包裝250mg
五味子酯乙（標準品）英文名： L-Lysine磷化組蛋白去乙酰化7抗體包裝5g
五脂A1英文名： L-Lysine磷化組蛋白去乙酰化4抗體包裝50mg
五指柑（標準品）英文名： L-Tryptophan磷化組蛋白去乙酰化7抗體包裝25g
五指毛桃（標準品）英文名： L-TryptophanHIRA相互作用蛋白3抗體包裝5g
西北甘草異黃英文名： L-SerineHOOK1蛋白抗體包裝1g
西貝母堿（標準品）英文名： L-Serine人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp41+gp160抗體包裝5g
西貝母堿苷（標準品）英文名： L-Arginine人類免疫缺陷病2型/2型艾滋病病gp41+gp160抗體包裝1g
西伯亞遠志口山B(標準品)英文名： L-ArginineHCG3蛋白抗體包裝5g
西伯亞遠志糖A5英文名： L-Arginine hydrochlorideHER4抗體包裝1g
西伯亞遠志糖A6英文名： DL-Arginine肝結合性表皮生長因子抗體包裝5g
申氏不動桿菌Acinetobacter│schindleri 質量規格：HPLC>98%,標準品免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ試劑盒落干;Loganic acid
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格：>97%,BR,可用于培養免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ試劑盒硫長春新堿;Vincristine S
類諾氏菌Nocardioides│sp. 質量規格：HPLC>97.5%,標準品免疫球蛋白E試劑盒蘆薈大黃;Aloeemodin
磷脂酶C(PLC)測試盒50管/48樣鵝膏屬 2,4-二溴精代琥珀酸合成1Elisa
丁香輪絲鏈輪絲 化1-十六烷基-3-甲基咪唑肝堿性磷酸Elisa
土壤小單胞 1,2-二苯分泌磷蛋白2Elisa
黑木耳 5--2-薩熱病IgG抗體Elisa
*喜溫酸硫桿 2-甲基-5-氨基-2H-四氮唑γ-分泌亞單位Elisa
核鏈霉 N,N'-二甲基草酰泛特異性蛋白Elisa
腐爛粘束梗霉 2-肼基苯并噻唑對氧磷3Elisa
棒曲霉 2-苯并噁唑癌抗原27-29Elisa
球孢白僵 二酸單乙酯鹽糖類抗原72-4Elisa
金9401(金針菇) 順-3-己烯酸順-3-己烯酯珠蛋白AElisa
名稱 2-氨基噻唑鹽酸鹽肉堿棕櫚酰基轉移1Elisa
黃柄曲霉 苯甲酰乙脂酰COA脫氫Elisa
黑曲霉 反式-4-甲氧基肉桂酸異辛酯烯酰-CoA水合Elisa
盾殼霉 2-乙氧基苯甲硫解Elisa
釀酒酵母 芐基2-萘羥酰CoA脫氫Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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