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RNA雜交緩沖液

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更新時間:2022-08-30 10:33:21瀏覽次數:276

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 100ml
貨號 FS-R7407 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7407
RNA雜交緩沖液公司正在銷售的產品:Anti-RPS12 Antibody大鼠S100蛋白
Anti-RPS13 Antibody大鼠S100B蛋白
Anti-RPS18 Antibody小鼠C肽
Anti-RPS15 Antibody人抗人絨毛膜促性腺抗體
Anti-RPS13 Antibody大鼠白介素1
Anti-RPS19BP1 Antibody小鼠熱休克蛋白糖蛋白96
Anti-RPS2

詳細介紹

產品分類:核酸雜交

儲存條件:4℃,避光,6個月

用途:用于RNA的含甲酰胺的雜交緩沖液,溶解RNA,并保護RNA

注意事項:由PIPES、EDTA、氯化鈉、去離子甲酰胺等組成。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

RNA雜交緩沖液

100ml

FS-R7407

 

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

假單胞菌NK受體2C抗體Human LAPTM4B(Lysosomal-associated transmembrane protein 4B) ELISA Kit人抗卵巢抗體(AOAb)

新月彎孢霉性受體NK-p46抗體Human PTGS1(Prostaglandin G/H synthase 1) ELISA Kit人抗磷脂酰絲抗體(APSA)

橡膠樹假絲酵母性受體NK-p30抗體Human COL28A1(Collagen alpha-1(XXVIII) chain) ELISA Kit人抗磷脂抗體(Apl/APA)

水生黃桿菌磷化谷受體2A抗體Human FBLN1(Fibulin-1) ELISA Kit人抗磷壁抗體(TA)

日本根霉NK受體2D抗體Human FLT4(Vascular endothelial growth factor receptor 3) ELISA Kit人抗淋巴球蛋白(ALG)

嗜熱鏈球菌核呼吸因子-1抗體Human DICER1(Endoribonuclease Dicer) ELISA Kit人抗淋巴抗體(ALA/LCA)

多主葡萄殼菌神經肽Y受體2抗體Human KIF5A(Kinesin heavy chain isoform 5A) ELISA Kit人抗鏈球菌溶血O/抗O(ASO)

海泥黃桿菌神經絲蛋白抗體Human GAD2(Glutamate decarboxylase 2) ELISA Kit人抗尿激V2受體/精加壓受體2(AVPR2)

粗皮側耳(平菇)軸索過度生長抑制因子A+B抗體 Nogo-B/AHuman FGF6(Fibroblast growth factor 6) ELISA Kit人抗尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)

紫芝神經元3抗體Human SERPINB4(Serpin B4) ELISA Kit人抗類固生成抗體(SCA)

孢小殼銀漢霉NFkB誘導激抗體Human UCN3(Urocortin-3) ELISA Kit人抗類風濕關節炎核抗原抗體(RANA)

Aeromicrobium marinum核因子p50/k基因結合核因子抗體Human MYH1(Myosin-1) ELISA Kit人抗類風濕關節炎核抗原(RANA)

硬結節桿菌神經激肽A受體/K物質受體抗體Human UBB(Polyubiquitin-B) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)

白環柄菇神經激肽B抗體Human FGFR1(Fibroblast growth factor receptor 1) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)

產黃青霉神經粘蛋白抗體Human BCAM(Basal cell adhesion molecule) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)

產氣莢膜梭菌 C型神經束蛋白抗體Human GLUL(Glutamine synthetase) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)

綠色木霉Trichoderma│viride 質量規格:>500U/MG,BR硫基葡萄糖

葡萄球菌Staphylococcus│sp. 質量規格:>98%,BR硫辛

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:0.97硫軟骨
RNA雜交緩沖液MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit  小鼠髓過氧化物mei規格: 48T

Gzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit  小鼠顆粒meiB規格: 48T

VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit  小鼠血管內皮細胞生長因子受體1規格: 48T

Gzms-A(Mouse granzymes A) ELISA Kit  小鼠顆粒meiA規格: 48T

Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit  小鼠淋巴細胞趨化因子規格: 48T


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