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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321264 |
商品介紹：
測定意義細胞色素P450酶系是一組主要存在于肝臟的同工酶，藥物在動物體內的I相反應主要依賴細胞色素P450酶系催化完成，許多藥物能誘導或抑制細胞色素P450系活性，從而引起藥物的療效降低、中毒和殘留發(fā)生率的增加。AH在P450酶系中相當于CYP2E1亞型，CYP2E1不僅參與了藥物的代謝，而且還能催化多種前致癌物和前毒物的活化過程。測定原理AH催化苯胺羥化后產生的4-氨基酚，進一步轉變?yōu)榉?吲哚復合物，該復合物在630nm處有最大吸收峰。實驗中所需儀器及設備：可見分光光度計、普通離心機，低溫超速離心機、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水、甘油和冰。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
異蓮心堿（標準品）英文名： Ethacrynic acidA型流感病-NS1抗體（神經(jīng)1）包裝5g
異綠原A(標準品)英文名： Maprotiline hydrochloride去腎上腺轉運蛋白/神經(jīng)遞質去腎上腺轉運體抗體包裝250g
異綠原B(標準品)英文名： Hydralazine hydrochloride磷化一氧化氮合成3（內皮型）抗體包裝100ml
異綠原C(標準品)英文名： Hydroxyzine dihydrochloride新的飽食分子蛋白抗體包裝25ml
異羅漢果皂苷 V英文名： Auranofin脊髓灰質炎病受體相關蛋白4抗體包裝1g
異芒果苷(標準品)英文名： TERBUTALINE SULFATE性受體NK-p80抗體包裝25g
異牡荊(標準品)英文名： MALTOTRIOSE粘附分子CD112抗體包裝5g
異南五味子木脂寧英文名： Procaterol HCl腎小球粘附分子受體抗體包裝250mg
異歐前胡（標準品）英文名： Sodium D-pantothenate 成纖維核受體Nr5a2抗體包裝100g
異皮啶（標準品）英文名： Nintedanib (BIBF1120)鈉鈣交換蛋白1抗體包裝25g
異去蟛蜞菊內酯英文名： Riboflavin-5-phosphate sodium鈉鈣交換蛋白3抗體包裝5g
異去氫鉤藤堿（標準品）英文名： D-(+)-Maltose monohydrate 天冬受體抗體包裝25g
異珊瑚菜英文名： Urea磷化核因子2相關因子2(Ser40)抗體包裝5g
異鼠李(標準品）英文名： D-BiotinNemo樣激抗體包裝25g
異鼠李-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷（標準品）英文名： Terfenadine磷化Nemo樣激抗體包裝5g
黑沙假單胞菌Pseudomonas│sabulinigri 質量規(guī)格：>99%,BR堿性成纖維生長因子試劑盒橙皮;Hesperetin
圈卷產色鏈霉菌淺色變種Streptomyces│ansochromogenes var. pallens 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品間皮試劑盒川陳皮;Naringin
地衣芽胞桿菌Bacillus│licheniformis 質量規(guī)格：>99%間變性淋巴瘤激試劑盒川續(xù)斷皂苷Ⅵ;Akebia saponi
苯胺4羥化酶（AH）測試盒50管/24樣橙色桿屬 2-二氟胰高血糖樣肽1Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 4,4'-(1-甲基亞乙基)雙(2-)胰高血糖樣肽2Elisa
豌豆根瘤 5-溴-2-三氟甲基嘧啶胰脂肪Elisa
氧化節(jié)桿 1-乙氧基-4-乙炔基苯乙脫氫Elisa
細孢毛霉 2-溴-1,3-二苯甲乙二1Elisa
植物乳桿植物亞種 五氟酸乙酯乙脫氫Elisa
吸水鏈霉 1-溴-4-(反式-4-n-戊基環(huán)己基)苯乙酰CoAElisa
pMV306hsp+LuxG13（addgene26161） 4-(3-甲氧基氧基)苯甲乙酰CoA羧化Elisa
豌豆根瘤 異丁酰醋酸甲酯乙酰Elisa
枯草芽孢桿 基環(huán)戊烷乙酰受體抗體Elisa
立枯絲核 (R)-(+)-2-乙酰氧基琥珀酸酐乙酰酯Elisa
多主葡萄殼 2,7-二羥基-9-芴酮乙酰轉移Elisa
食鹿角菜假交替單胞 對十二烷基苯磺酰疊氮乙酰羧化Elisa
番茄枯萎病 1-己基吡啶六氟磷酸鹽乙酰肝Elisa
膠凍樣類芽孢桿 左炔諾孕酮乙型肝炎E抗原Elisa
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