A培養(yǎng)基緩沖液公司正在銷售的產品：兔CCAAT增強子結合蛋白γ(C/EBPγ)試劑盒 Anti-CKAP5 Antibody腫瘤壞死因子受體相關蛋白2抗體
兔周期素依賴性激酶4(CDK4)試劑盒 Anti-CKB Antibody蛋白酶調解因子7抗體
兔熱休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)試劑盒 Anti-Clathrin heavy chain/CLTC Antibody磷酸化增殖核抗原

產品分類：培養(yǎng)基

儲存條件  4℃,6個月

用途  配制培養(yǎng)基的緩沖液

注意事項  無菌溶液。主要由磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸銨、檸檬酸鈉等組成,經高壓滅菌處理。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

跨膜絲蛋白2(TMPRSS2)TMPRSS2 ELISA Kit活化半胱蛋白蛋白3抗體包裝25g

跨膜蛋白27(TMEM27)TMEM27 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框61抗體包裝5g

克細胞蛋白16(CC16)CC16 ELISA Kit少突膠質跨膜蛋白抗體包裝1g

可溶性半乳糖凝集3結合蛋白(LGALS3BP)LGALS3BP ELISA Kit激分子B7-1蛋白抗體包裝1g

顆粒體蛋白(GRN)GRN ELISA Kit末端補體復合物抗體包裝250mg

顆粒M(GZMM)GZMM ELISA Kit8號染色體開放閱讀框55抗體包裝25g

顆粒K(GZMK)GZMK ELISA Kit補體C4a+C4b蛋白抗體包裝5g

顆粒B(GZMB)GZMB ELISA KitCD44V7抗體包裝100g

顆粒A(GZMA)GZMA ELISA KitCD44V10抗體包裝25g

抗增殖細胞核抗原(PCNA)PCNA ELISA KitCD44V4抗體包裝1g

抗凝血(AT)AT ELISA Kit緊密連接蛋白4抗體包裝25g

抗繆勒管激(AMH)AMH ELISA Kit6號染色體開放閱讀框140抗體包裝5g

抗尿激(ADH)ADH ELISA KitL型鈣通道蛋白抗體包裝100g

抗酒石性磷(ACP5)ACP5 ELISA Kit電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體包裝25g

抗肌蛋白(UTRN)UTRN ELISA Kit緊密連接蛋白3抗體包裝5g

: AS1.3221資源名稱: 約氏乳桿菌 質量規(guī)格：含量> 99%，BR，可用于培養(yǎng)酯酰甘油激ζ試劑盒梓;Catalpol

多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)脂氧A4試劑盒知母皂苷 BⅡ;Timosaponin

藍色犁頭霉Absidia│coerulea 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品脂聯受體2試劑盒梔子苷;Geniposide
A培養(yǎng)基緩沖液HER2 receptor(NT)/FITC  熒光標記抗c-erbB-2受體(N端)IgG 光譜純, ≥99.8%

HER2 receptor/FITC  熒光標記抗HER2受體IgG for DNA synthesis, ≥99.9% (GC)

HER2 receptor/FITC  熒光標記抗c-erbB-2受體IgG 梯度級, for HPLC, ≥99.9%

Phospho-HER2(Tyr1221/1222)/FITC  熒光標記化HER2受體IgG 無水級, 99.9%,H2O≤ppm

Phospho-HER2(Tyr1112) /FITC  熒光標記化HER2受體IgG無水H2O:20-30ppm

Phospho-HER2(Tyr1248) /FITC  熒光標記化HER2受體IgG無水 無水級, 99.8%,H2O：30-50ppm

Phospho-HER2 (Tyr877)/FITC  熒光標記化HER2受體IgGN，N-二酰 無水級, 99.8%

HER3/ErbB3 /FITC  熒光標記HER3受體IgG酯 ACS, ≥99.5%