山梨醇-磷酸鹽溶液公司正在銷售的產品：兔纖連蛋白富亮跨膜蛋白2(FLRT2)試劑盒Anti-FN1 Antibody離子轉運相關蛋白SLC7A9抗體
兔谷胱甘肽S轉移酶α5(GSTα5)試劑盒Anti-FOSB Antibody溶質載體蛋白家族20成員2抗體
兔中性粒堿性磷酸酶(NAP)試劑盒Anti-FNDC5 AntibodyS100鈣結合蛋白A6抗體
兔單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)

產品分類：細胞組分分離

儲存條件：4℃,6個月

用途：分離細胞核

注意事項：主要由山梨醇、磷酸鉀溶液(pH7.5)、EDTA(pH7.5)、去離子水組成。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

（標準品） Cetirizine 2HCl磷化表面趨化因子受體4抗體包裝25g

（標準品） Cetrorelix Acetate磷化表面趨化因子受體2抗體包裝5g

地紅霉（標準品） Chelerythrine中心體蛋白104抗體包裝100mg

地喹（標準品） Chlorhexidine Acatate/乙磷轉移1抗體包裝1g

地羅司(標準品) Fluvastatin sodium salt6號染色體開放閱讀框163抗體包裝500mg

地雷他定（標準品） Fluvastatin sodium salt6號染色體開放閱讀框165抗體包裝1g

磷酯（標準品） Clinafloxacin6號染色體開放閱讀框168抗體包裝250mg

/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷（標準品） Levamisole HCl6號染色體開放閱讀框173抗體包裝5g

海（標準品） Levamisole HCl6號染色體開放閱讀框182抗體包裝1g

海雜質Ⅰ（標準品） Clomipramine HCL 6號染色體開放閱讀框186抗體包裝5g

海雜質Ⅱ（標準品） Clomipramine HCL 6號染色體開放閱讀框191抗體包裝10g

海雜質Ⅲ（標準品） Clopidogrel Bisulfate6號染色體開放閱讀框195抗體包裝1g

化（標準品） Clopidogrel Bisulfate6號染色體開放閱讀框199抗體包裝5g

帕(標準品) Clopidogrel Bisulfate7號染色體開放閱讀框34抗體包裝1g

普羅（標準品） Nabumetone6號染色體開放閱讀框201抗體包裝100g

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：>98.0%雄烯二新;Mesaconitine

雅致小克銀漢霉（斜面）Cunninghamella elegans 質量規格：≥98.0%雄激受體試劑盒新;Neohesperidin

墻壁圣格爾根菌Georgenia│muralis 質量規格：>98%,USP31,BR胸腺依賴性抗原試劑盒細葉遠志皂苷;Tenuifolin
山梨醇-磷酸鹽溶液NFKB p52/NF-κB2 p0/FITC  熒光標記核因子/k因結合核因子 p52/p0IgG阿魏 99%

Phospho-NF-κB2 p0 (Ser866/870)/FITC  熒光標記核因子/k因結合核因子p0IgG阿魏 ，≥99.5%（HPLC）

p-NFKBp65(Ser536)/FITC  熒光標記化核因子/化k因結合核因子IgG四氮唑 98%

Phospho-NFKBp65 (Ser276)/FITC  熒光標記化核因子NF-κB p65IgG植鈣 Ca: 20.0 ～ 24.0 %

Phospho-NF-KappaB p5 (Ser933)/FITC  熒光標記化核因子p50/k因結合核因子IgG苯二縮 98%

NGAL/FITC(Neutrophil Gelatinase associated Lipocalin)  熒光標記中性粒明膠相關載脂蛋白IgG苯二縮 ≥98%,Kosher

NGB/FITC  熒光標記腦紅蛋白/神經血紅蛋白IgG3,4-己二酮 96%,FCC

NGF- Beta/FITC  熒光標記神經生長因子-βIgG烯硫 50%