詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
雙鏈DNA中和緩沖液 | 100ml | FS-R7403 |
產品分類:核酸雜交
儲存條件:室溫,12個月
用途:又稱為中性轉移緩沖液,僅用于雙鏈DNA的雜交
注意事項:由tris-hcl、氯化鈉組成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
樟疫霉粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體Human RGS3(Regulator of G-protein signaling 3) ELISA Kit人抗增殖核抗原抗體(PCNA)
貝倫格勒座腔菌梨專化型粘蛋白4抗體Human RGS10(Regulator of G-protein signaling 10) ELISA Kit人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)
釀酒酵母v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體Human HMGB4(High mobility group protein B4) ELISA Kit人抗原提呈相關轉運蛋白/T活化蛋白(TAP)
Phoma medicaginis var. medicaginis基質金屬蛋白-10抗體Human PENK(Proenkephalin-A) ELISA Kit人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)
松乳菇突變型P53抗體Human RGS10(Regulator of G-protein signaling 10) ELISA Kit人抗異質型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)
黃蓋蜜環菌蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體Human ARSA(Arylsulfatase A) ELISA Kit人抗胰島受體抗體(AIRA)
粉狀畢赤氏酵母基質金屬蛋白-24抗體Human HMGB4(High mobility group protein B4) ELISA Kit人抗(AT)
黑絡丸巨噬甘露糖受體抗體Human RGS3(Regulator of G-protein signaling 3) ELISA Kit人抗眼肌抗體(EMAb)
釀酒酵母胃粘液抗體Human ATOH1(Protein atonal homolog 1) ELISA Kit人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)
枯草芽孢桿菌基質金屬蛋白20抗體Human KLF14(Krueppel-like factor 14) ELISA Kit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)
平臍蠕孢菌尿調節蛋白抗體Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)
根瘤菌肌增強因子2抗體Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)
枯草芽孢桿菌肌原調節蛋白抗體Human PRSS2(Trypsin-2) ELISA Kit人抗血小板抗體(anti-PA Ab)
越南芽孢桿菌神經母特異性轉移因子抗體Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗胸腺球蛋白(ATG)
釀酒酵母組織相關抗原HLA-B15抗體Human CDO1(Cysteine dioxygenase type 1) ELISA Kit人抗信號識別顆粒抗體(SRP)
Gordonia蛋腺苷轉移抗體Human CYP2D6(Cytochrome P450 2D6) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)
腐生葡萄球菌Staphylococcus│saprophyticus 質量規格:≥30units/mg protein,sigma原裝蒙花苷
細極鏈格孢蒜生變種Alternaria│tenuissima var. alliicola 質量規格:進分沒食子
無乳鏈球菌Streptococcus│agalactiae 質量規格:≥95%,半硫鹽木犀草苷
雙鏈DNA中和緩沖液ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 小鼠上皮中性粒細胞活化肽78規格: 48T
OLAb(Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody) ELISA KIT 小鼠氧化低密度脂蛋白規格: 48T
ASMA(Mouse Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌規格: 48T
M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細胞系MESPU30規格: 48T
NF-κB p65(Mouse nuclear factor-κB p65) ELISA Kit 小鼠核因子κB亞基p65親和肽規格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。