詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定原理強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物;紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質,適用于蛋白質濃度高的樣品,尤其是動物材料。試劑組成和配置1、雙縮脲試劑×1瓶,4℃保存; 2、10mg/ml標準蛋白×1支,-20℃保存; 3、標準蛋白配制:取10mg/ml標準蛋白100μl加雙蒸水100μl,即得5mg/ml標準蛋白溶液。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321369 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
冬菇屬周期蛋白依賴性激樣3抗體Human PP(Pepsin) ELISA Kit人肽基脯酰順反異構(PPI)免疫試劑盒
煙草節桿菌殺菌肽/天蠶抗菌肽單克抗體Human Pro-MMP-10(Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit人胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒
灰色鏈霉菌灰色亞種第十七號染色體開放閱讀框87抗體Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒
洋蔥伯克霍爾德菌降鈣受體抗體Human PP13(Placental Protein13) ELISA Kit人胎盤堿性磷(PLAP)免疫試劑盒
膠孢補體C2a鏈多肽抗體Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit人胎盤蛋白13(PP13)免疫試劑盒
沙門氏菌馬凝集試驗抗原CD80抗體Human RIPK2(Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit人胎盤催乳(HPL)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌CD19抗體Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit人胎兒血紅蛋白(HBF)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種C-C元件趨化因子26抗體Human PTP1B(protein tyrosine phosphatase 1B) ELISA Kit人胎兒纖連蛋白(fFN)免疫試劑盒
產克雷伯氏菌5號染色體開放閱讀框22抗體Human RLN2(Relaxin-2) ELISA Kit人鎖鏈(DES)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌鈣激活離子通道4蛋白抗體Human PTPRJ(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit人羧甲基賴(CML)免疫試劑盒
香栓菌嗜粒趨化蛋白3抗體Human PTPN14(protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 14) ELISA Kit人羧化基質谷蛋白(ucMGP)免疫試劑盒
栗疫菌嗜粒趨化蛋白3抗體Human PTPRN(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit人羧化不全骨鈣(ucOC)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌趨化抗體Human PYGL(Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit人髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒
空泡單胞菌5號染色體開放閱讀框55抗體Human PYGM(Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA Kit人髓性核分化抗原(MNDA)免疫試劑盒
糞生黑蛋巢表面趨化因子受體7抗體Human Pro-MMP-13(Pro-Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit人髓系觸發受體-1(TREM-1)免疫試劑盒
普茅斯沙雷氏菌色c氧化7A2抗體Human Rac-GAP1(Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit人髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)免疫試劑盒
詹氏生絲單胞菌Hyphomonas│jannaschiana 質量規格:>98%,BRCD68分子試劑盒N,N’-二基蝙蝠葛堿化物
蘇云金芽胞桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:BCCD63分子試劑盒1,7-二羥基-3,4-二氧基山-7
褐囊蜜環菌Armillaria│bruneocystidia H.C. Wang,G.F. Qin & J. Zhao 質量規格:>99%,BRCD5分子樣蛋白試劑盒β,β’-二基烯酰阿寧
雙縮脲法蛋白含量測試盒50管/48樣粉粒紅濕傘 D-肉堿3,4二羥基Elisa
*蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草) 鄰苯二-Ο,Ο′-二乙酸谷氧還蛋白Elisa
頂孢頭孢霉 2--5-(三氟甲基)苯磺酰甘膽酸Elisa
皺紋單胞 亞硝酸叔丁酯I型膠原蛋白Elisa
北土地桿 4--3-硝基吡啶鹽酸鹽II型膠原蛋白Elisa
枯草芽孢桿 1,2-乙二硫S100A12鈣結合蛋白Elisa
隔離土地桿 3-羥基丁酸乙酯膽囊收縮Elisa
炭疽芽胞桿 2-溴噻唑-5-甲酸血管緊張IIElisa
細鏈格孢 2,6-二甲基芐腎Elisa
巴奈特酵母 5-硝基吲唑多藥耐藥相關蛋白2Elisa
煙管 3-乙基-5-(2-)-4-甲基噻唑溴化物胞壁酰二肽3Elisa
布氏白僵(卵孢白僵) 6-核苷微管相關蛋白7Elisa
枯草芽胞桿 乙酰酸乙酯環氧化2Elisa
釀酒酵母 2-氨基噻唑-4-甲酸乙酯c-Kit蛋白Elisa
大腸桿 2-氨基-5-氟β1 腎上腺受體抗體Elisa