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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321209 |
商品介紹：
測定意義 SSS（EC 2.4.1.21）通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中，催化淀粉鏈延長，主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。 測定原理 SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng)，將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時(shí)生成ADP，在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比，340nm下測定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
3,29-二酰基栝樓仁三（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Fmoc-Ala-OH瘤病調(diào)控因子1抗體（鋅指蛋白395）包裝5g
3,3'-二基鞣花-4'-O-葡萄糖苷英文名： Fmoc-Phe-OH人類狀瘤病18 E6單克抗體包裝1g
3,6-二芥子酰基蔗糖（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Fmoc-Val-OH異質(zhì)核糖核蛋白F抗體包裝25g
3-(3-羥基基)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Fmoc-Asn(Trt)-OH異質(zhì)核糖核蛋白K抗體包裝5g
3-Deoxyaconitine英文名： Fmoc-Lys(Z)-OH異質(zhì)核糖核蛋白L抗體包裝5g
3-O-Acetyl-16α-hydroxytrame...英文名： Fmoc-Lys-OH·HClHER2受體單克抗體包裝1g
3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李...英文名： Oxyresveratrol癌分化因子P45抗體 Heregulinβ包裝5g
3-O-乙酰基-16α-羥基松苓新英文名： Oxyresveratrol肝脂抗體包裝1g
3’-氧基芹菜苷；柯伊-7-O-葡萄糖-2-O-...英文名： Acetyl-resveratrol磷化組蛋白去乙酰化1抗體包裝250mg
3β,7β,12β-三羥基-11,15-二羰基-羊毛甾...英文名： Acetyl-resveratrol解旋樣轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝1g
3β,7β,15β-三羥基-11-羰基-羊毛甾烷-8-...英文名： Fmoc-Lys(Mtt)-OH三羥基三基合成2抗體包裝250mg
3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-（標(biāo)...英文名： Fmoc-Thr(Bzl)-OH人類白抗原A抗體包裝1g
4'-去鬼臼英文名： Fmoc-Lys-OH羥類固脫氫17β2抗體包裝250mg
4'-去氧基表鬼臼（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester羥類固脫氫17β-HSD抗體包裝5g
4-β-D-葡萄糖基-1,3,7-三羥基呫噸英文名： Fmoc-Asp(OH)-OtBu人肝單克抗體/肝特異性抗原抗體包裝1g
桑黃Phellinus│linteus (Berk. & M.A. Curtis) Teng 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)磷化腺苷活化蛋白激試劑盒N-基野靛堿;Caulophyllin
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumanii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR磷化外信號調(diào)節(jié)激試劑盒肌; Inositol
溜曲霉Aspergillus│tamarii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品磷化糖原合成激3試劑盒加蘭他敏;Galanthamine
可溶性淀粉合成酶(SSS）測試盒100管/96樣Lactococcus 5-溴-2-甲基-4-內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖Elisa
棒曲霉 3-甲基-3-苯基縮水甘油酸乙酯(異構(gòu)體混合物)NADP依賴性甘油-3-磷酸脫氫Elisa
香茅假單胞 氨基鈉海藻糖-6-磷酸合成Elisa
放射形根瘤 酸葡萄糖-6-磷酸Elisa
孤島鹽單胞 硫酸亞鐵七水合物葡萄糖-1-磷酸Elisa
海南小短桿 硝酸鐵(III) 九水合物Elisa
梾木生殼針孢 2,2-二苯基烷磷酸葡萄糖變位Elisa
植物乳桿植物亞種 3-羥基谷氨酰tRNA還原Elisa
枯草芽孢桿 桂酸異酯5-氨基乙酰酸合成Elisa
燼灰紅鏈霉果糖發(fā)酵亞種 磷酸鋅酮酸Elisa
賴芽胞桿屬 3-溴-4-氟苯甲蕓苔內(nèi)酯Elisa
根瘤 3-溴-4-氟苯甲脂肪酸合成Elisa
木蹄層孔 氟化銀(I)乙脫氫Elisa
黑木耳 化錳乳酸脫氫Elisa
植物乳桿 -3-羧酸乙酯酮酸脫羧Elisa
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