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磷酸酶抑制劑

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更新時間:2022-08-30 11:55:11瀏覽次數:479

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 10ml
貨號 FS-R7523 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7523
磷酸酶抑制劑公司正在銷售的產品:Anti-ZNF785 Antibody人1,25二羥基
Anti-ZP4 Antibody人組蛋白H2b
Anti-ZRANB2 Antibody人骨保護素
Anti-ZNHIT1 Antibody人骨成型蛋白受體Ⅱ
Anti-ZNRF2 Antibody人骨成型蛋白受體1A
Anti-ZRANB2 Antibody人骨成型蛋白4
Anti-ZSCAN2

詳細介紹

63.jpg
產品分類:酶抑制劑

儲存條件:—20℃,12個月

用途:用于動物細胞或組織蛋白的提取,能zui大程度地保持蛋白質磷酸化,常用于動物細胞或組織中蛋白激酶活性和信號傳導的研究。

注意事項:為多種磷酸酶抑制劑混合液,可有效抑制酪氨酸磷酸酶、絲氨酸磷酸酶、蘇氨酸磷酸酶、酸性和堿性磷酸酶等各種磷酸酶。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

磷酸酶抑制劑

10ml

FS-R7523

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

林生蠟蘑磷化Rad51抗體Anti-EDA Antibody2(PRM2)

具核梭桿菌聚核亞種磷化成骨特異性轉錄因子抗體Anti-EDA Antibody釉原蛋白Y-連鎖(AMELY)

毛木耳(臺耳)磷化G蛋白信號轉導調節因子19抗體Anti-EDNRB Antibody釉原蛋白X-連鎖(AMELX)

藤倉鐮孢G蛋白信號轉導調節因子19抗體Anti-EDNRB Antibody(PB0585)釉成熟蛋白(AMTN)

枯草芽孢桿菌環指蛋白1抗體Anti-EED Antibody誘導型一氧化氮合(NOS2)

糞腸球菌原癌基因c-Met相關酪激抗體Anti-EEA1 Antibody有機溶質載體伴侶1(OSCP1)

尿八疊球菌磷化原癌基因c-Met相關酪激抗體Anti-EGF Antibody游離脂肪受體1(FFAR1)

類諾氏菌屬腫瘤血管內皮調節蛋白Robo4抗體Anti-EGF Antibody硬脂酰去飽和(SCD)

馬里斯棒狀桿菌軸突導向受體抗體Anti-EGF Antibody硬纖毛蛋白(STRC)

馬賽菌絡絲蛋白抗體Anti-EGF Antibody應激誘導磷蛋白1(STIP1)

頭花革菌RUSC1抗體Anti-EGFR Antibody營養蛋白(TRO)

枯草芽胞桿菌RUSC2抗體Anti-EGFL6 Antibody隱花色2(CRY2)

釀酒酵母RAGEF2蛋白抗體Anti-EGFR Antibody隱花色1(CRY1)

釀酒酵母G蛋白偶聯受體RAB23抗體Anti-EGFR Antibody乙-N-甲基轉移(INMT)

山茶G蛋白信號調節因子14抗體Anti-EGFR Antibody陰離子/糖轉運蛋白(AST)

油菜假單胞菌核轉錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體Anti-EGFR Antibody易位關聯膜蛋白1(TRAM1)

致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR

擬內孢霉Endomycopsis│sp. 質量規格:>98%,可用于培養

莖點霉Phoma│sp. 質量規格:>98%,BR
磷酸酶抑制劑ATRN/FITC  熒光su標記吸引suIgG規格: 0.2ml

ATX/Autotaxin/E-NPP2/FITC  熒光su標記自分泌運動因子IgG規格: 0.2ml

ATXN1/Ataxin 1/FITC  熒光su標記兔抗人、大、小鼠失調癥蛋白1IgG規格: 0.2ml

Ataxin-1(phospho Ser776)/FITC  熒光su標記兔抗人、大、小鼠磷suan化失調癥蛋白1IgG規格: 0.2ml

AU5 tag/FITC  熒光su標記AU5 tag標簽IgG規格: 0.2ml

 


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