詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義: 糖類物質是構成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質。總糖也可稱為碳水化合物,包括可溶性的單糖,二糖以及不溶性的淀粉,纖維素,幾丁質等。 測定原理: 總糖酸水解為還原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS試劑與還原糖共熱后被還原成氨基化合物,在過量的NaOH堿性溶液中呈桔紅色,在540nm處有最大吸收峰,以此測定樣品中的總糖含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、沸水浴、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS6321254 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
沙棘(標準品)英文名: Oroxin B激-M2包裝100g
沙棘膏(標準品)英文名: Fosfomycin tromethamine間皮抗體包裝25g
沙苑子(標準品)英文名: Fosfomycin tromethamine基質金屬蛋白-1抗體包裝100g
沙苑子苷(標準品)英文名: Cynaroside基質金屬蛋白-1抗體包裝25g
沙苑子苷A(標準品)英文名: Costundide基質金屬蛋白13抗體包裝5g
砂仁(陽春砂)(標準品)英文名: Pseudoginsenoside F11基質金屬蛋白-14抗體包裝100ml
山茶甙A英文名: Pseudoginsenoside RT5基質金屬蛋白2抗體包裝25ml
山茶甙B英文名: Allantoin基質金屬蛋白3抗體包裝250mg
山茶苷A英文名: Limonin基質金屬蛋白-7抗體包裝100mg
山豆根(標準品)英文名: Limonin基質金屬蛋白-9抗體包裝1g
山風(標準品)英文名: Limonin髓鞘少樹突膠質糖蛋白抗體包裝500mg
山姜(標準品)英文名: Stearic acid多藥耐藥相關蛋白1抗體包裝10MG
山橿根(標準品)英文名: Stearic acid多藥耐藥相關蛋白2抗體包裝50MG
山臘梅葉(標準品)英文名: Arctigenin多藥耐藥相關蛋白3抗體包裝100g
山蠟梅堿英文名: Arctiin線粒體核糖體蛋白L28抗體包裝25g
棒桿菌Corynebacterium│sp. 質量規格:純度≥98.0%抗表皮基底膜抗體試劑盒大葉茜草;Rubimaillin
鏈格孢Alternaria│sp. 質量規格:≥850 μg/mg,BR抗斑疹傷寒抗體試劑盒大黃;Emodin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規格:標準品用于含量測定抗白色念珠菌試劑盒膽維他;Anethole trithio
總糖含量測試盒100管/96樣沙漠畢赤酵母 2-氨基-4,5-二甲基噻-3-羧酸乙酯谷脫氫Elisa
灰色鏈霉 2,4-二氟-3-甲谷氨酰Elisa
點枝頂孢 3-甲基烯酰基苯酸Elisa
阿舒假囊酵母 烯酸十八酯S轉移A1Elisa
朱紅叢赤殼 2,4-二氟-3-S轉移Mu1Elisa
*蟲擬蠟 苯并氧化呋咱過氧化Elisa
棒彎孢 1-Cbz-氨基環烷羧酸巰基轉移Elisa
白腐 可可提取物骨保護Elisa
炭疽盤孢 顏料紅254骨成型蛋白2Elisa
仁果叢梗孢 N-Boc-N'-Fmoc-L-賴骨成型蛋白4Elisa
枯草芽孢桿 4-氟-3-甲酰基骨成型蛋白6Elisa
冷海希瓦氏 1-溴-3-氟-5-苯骨成型蛋白7Elisa
費氏中華根瘤 2-溴-6-氟苯甲骨鈣Elisa
肉座屬 5-羥甲基-1-甲基-1H-吡唑骨堿性磷酸Elisa
大黃歐文氏 5-氨基-6--2-骨橋Elisa