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Tris-甘油加樣緩沖液

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更新時間:2022-08-30 11:29:04瀏覽次數:318

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5ml
貨號 FS-R7482 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7482
Tris-甘油加樣緩沖液公司正在銷售的產品:Anti-TP53INP1 Antibody人重去甲腎上腺素
Anti-TP53I3 Antibody大鼠窖蛋白Caveolin1
Anti-TP63 Antibody大鼠艾杜糖硫酸酯酶
Anti-TPD52L2 Antibody人前列環素
Anti-TPD52L2 Antibody人降鈣素原
Anti-TPD52L1 Antibody大鼠血管內皮生長因

詳細介紹

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

Tris-甘油加樣緩沖液

5ml

FS-R7482

產品分類:蛋白電泳

儲存條件:4℃,12個月

用途:配制Tris非變性連續PAGE凝膠

注意事項:主要由Tris-HCl、甘油、溴酚藍組成。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

巨大芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA11抗體Anti-CCN3 AntibodyC反應蛋白(CRP)

堅強芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA12抗體Anti-CCNA1 AntibodyC多肽(CP)

黑色附球霉原鈣粘蛋白β12抗體Anti-CCNA2 Antibody(PB0402)CXC趨化因子受體7(CXCR7)

塔賓曲霉原鈣粘蛋白β3抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體4(CXCR4)

朱黃籃狀菌原鈣粘蛋白γB1抗體Anti-CCNA1 AntibodyCXC趨化因子受體3(CXCR3)

大腸埃希菌原鈣粘蛋白γB2抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體1(CXCR1)

腸桿菌屬原鈣粘蛋白γB4抗體Anti-CCNB1 Antibody(PB0130)CXC趨化因子配體16(CXCL16)

香菇原鈣粘蛋白γB6抗體Anti-CCNB2 AntibodyCX3C趨化因子受體1(CX3CR1)

膠孢鐮孢原鈣粘蛋白γC3抗體Anti-CCNB2 AntibodyCOP9結構光形態發生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)

芥黃蜜環菌原鈣粘蛋白γC4抗體Anti-CCNB1 Antibodyc-myc癌基因產物(c-myc)

山茶磷蛋白聚糖PTPRZ抗體Anti-CCND2 Antibodyc-Jun基末端激/應急激活的蛋白(JNK/SAPK)

桿狀毛霉神經特異蛋白酪磷N5抗體Anti-CCND1 AntibodyCDCP1(CDCP1)

豬瘟病間接免疫熒光足表達蛋白/轉錄因子21抗體Anti-CCND3 Antibody(PB0131)CD8分子(CD8)

Bacillus tequilensis孕激受體抗體Anti-CCND1 AntibodyCD82分子(CD82)

枯草芽孢桿菌神經突觸蛋白PCLO抗體Anti-CCND1 AntibodyCD73分子(CD73)

諾爾氏菌早老γ分泌2抗體Anti-CCP110 AntibodyCD6分子(CD6)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:0.98

: AS1.166M010資源名稱: 苜蓿根瘤菌 質量規格:0.99

小刺青霉Penicillium│spinulosum 質量規格:0.98
Tris-甘油加樣緩沖液ACD/PTOP/FITC  熒光su標記腎上腺皮質發育異常蛋白IgG規格: 0.2ml

ACE1/FITC  熒光su標記血管緊張su轉換meiIgG規格: 0.2ml

ACE2/FITC  熒光su標記血管緊張su轉換mei2IgG規格: 0.2ml

ACEI/FITC  熒光su標記血管緊張su1轉換mei抑制劑IgG規格: 0.2ml

Acetyl CoA Carboxylase/FITC  熒光su標記兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰輔meiA羧化meiIgG規格: 0.2ml

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

 


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