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AAF固定液

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更新時間:2022-07-24 09:37:52瀏覽次數:459

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規格 500ml
貨號 FS-R6780 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6780
AAF固定液公司正在銷售的產品:雞基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒Anti-PYY Antibody磷酸化核突觸蛋白α抗體
雞Rap鳥嘌呤交換因子1(RAPGEF1)試劑盒Anti-PYROXD1 Antibody離子轉運相關蛋白SLC7A9抗體
雞骺蛋白聚糖(EPYC)試劑盒 Anti-PTTG1 Antibody乙酰轉運蛋白1抗體
雞過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子

詳細介紹

產品分類:固定液

儲存條件:室溫,12個月

用途:也叫FAA/AFA固定液(50%),又稱萬能固定劑,可用于植物單細胞及絲狀藻類等幼嫩材料的固定,不用于植物一般組織的固定。FAA固定劑可兼做保存劑。

注意事項:主要由50%乙醇、冰乙酸、甲醛等組成。常用于快速脫水和固定以及冷凍切片的快速固定。可作為組織材料的保存劑。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

AAF固定液

500ml

FS-R6780

 

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

鵝不食草(標準品) 6-O-Benzylguanine(O6BG)JWA蛋白抗體包裝100g

厄弗 Hypocrellin連接蛋白JPH3抗體包裝25g

餓螞蝗(標準品) Fluorometholone連接粘附分子C抗體包裝5g

蒽醌(標準品) Fluorometholone蛋白質酪激JAK-1抗體包裝100g

兒茶(兒茶)(標準品) Acemetacin組蛋白去基化JMJ2A抗體包裝25g

兒茶沒食子酯 Acemetacin組蛋白去基化JMJD5抗體包裝5g

二基庚烷A(標準品) Chlorpromazine HCl磷化γ連環蛋白抗體包裝1g

二羥(標準品) Chlorpromazine HClJNK相互作用蛋白4抗體包裝5g

二氫丹參I(標準品) Dirithromycin基末端激1/2抗體包裝1g

二氫(標準品) Dirithromycin基末端激1/2/3抗體包裝1g

二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯(標準品) (2S)-2-amino-5-[(N,N'-dimethylcarbamimidoyl)amino]pentanoic acid基末端激1/3抗體包裝25g

二氫歐山芹當歸酯(標準品) Ceftizoxime sodium連接蛋白JPH4抗體包裝5g

二氫小檗堿(標準品) Ceftizoxime sodium組蛋白去基轉移JMJD7抗體包裝1g

二氫楊梅(標準品) Pyrogallol磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g

二氫醉椒 Trametinib (GSK1120212)磷化活化蛋白激D抗體包裝10MG

: Bt0266資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質量規格:HPLC>99%,標準品抗組酰基tRNA合成,質試劑盒胡椒堿;Piperine

NBRC13957=ATCC14485資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質量規格:≥99%,BR抗內膜抗體試劑盒高熊果苷;

: ATCC43964資源名稱: Hyphomonasjohnsonii 質量規格:>98%,標準品抗滋養膜抗體試劑盒甘草次十八酯;Stearyl glyc
AAF固定液Collagen IV  人IV型膠原規格: 48T

Collagen VI  人VI型膠原規格: 48T

HA  人透明質suan規格: 48T

LN  人層粘連蛋白規格: 48T

ChRM2(Human)  人毒蕈型乙酰受體M2規格: 48T


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