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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
乙酸凝膠緩沖液 | 100ml | FS-R7480 |
產(chǎn)品分類：蛋白電泳
儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月
用途：配置乙酸非變性連續(xù)PAGE凝膠的配制
注意事項(xiàng)：主要由乙酸鈉、冰乙酸組成,按不同比例混合獲得相應(yīng)pH值。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
哈茨木霉青霉G抗體Anti-CCKBR AntibodyGTP活化蛋白(GAP)
松鼠葡萄球菌松鼠亞種磷酯Cβ1抗體Anti-CCL1 AntibodyGTPNRas(NRAS)
紅色紅曲霉富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體Anti-CCL1 AntibodyGremlin-1蛋白(GREM1)
根瘤菌NADPH氧化活化蛋白p47抗體Anti-CCL11 AntibodyGDP解離抑制因子2(GdI2)
大豆慢生根瘤菌蛋白體PRS7抗體Anti-CCL11 AntibodyG1/S特異性周期蛋白E1(CCNE1)
黑腐皮殼菌蛋白體PSMα1抗體Anti-CCL11 AntibodyF-肌動(dòng)蛋白(F-actin)
中華根瘤菌蛋白體PSMα2抗體Anti-CCL11 AntibodyFOS 樣抗原2(FOSL2)
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種蛋白體PSMα6抗體Anti-CCL13 AntibodyFMS樣酪激3配體(Flt-3L)
竹喙球菌蛋白體PSMα7抗體Anti-CCL17 AntibodyFMS樣酪激3(Flt3)
猴頭菇孕誘導(dǎo)阻斷因子1抗體Anti-CCL19 AntibodyFc受體樣蛋白3(FCRL3)
鏈格孢多腺苷二磷多聚16抗體Anti-CCL18 AntibodyFAS配體(Fas L)
釀酒酵母成對(duì)樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體Anti-CCL16 AntibodyFAM172A蛋白(FAM172A)
微紅帚霉RNA聚合II抗體Anti-CCL2 AntibodyE選擇(E-Selectin/CD62E)
加鏈霉菌T淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體Anti-CCL2 AntibodyE選擇(E-Sel)
德假單胞菌蛋白調(diào)解因子9抗體Anti-CCL21 AntibodyE鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)
大腸埃希氏菌胰腺激抗體Anti-CCL20 AntibodyEphrin-B2(EFNB2)
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分
鹽漬鹽單胞菌Halomonas│salaria 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
乙酸凝膠緩沖液ABCG1/FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG1IgG規(guī)格： 0.2ml
ABCG2/FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG2IgG規(guī)格： 0.2ml
ABCG4/FITC 熒光su標(biāo)記抗ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白IgG規(guī)格： 0.2ml
c-Abl /FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠非受體酪氨suan激meic-AblIgG規(guī)格： 0.2ml
ABL2/FITC 熒光su標(biāo)記ABL2IgG規(guī)格： 0.2ml
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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