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臺盼藍染色液

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更新時間:2022-07-06 10:13:44瀏覽次數:564

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50ml
貨號 FS-R6662 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6662
臺盼藍染色液公司正在銷售的產品:豚鼠血管緊張素轉化酶2(ACE2)試劑盒 Anti-MBD4 Antibody磷酸化血管擴張激磷蛋白抗體
豚鼠間隙連接蛋白31(CX31)試劑盒 Anti-MBD2 Antibody磷酸化血管內皮生長因子受體2抗體
豚鼠轉錄激活因子-2(ATF-2)試劑盒 Anti-MBD4 Antibody磷酸化血管內皮生長因子受體2抗體
豚鼠肌生成素(MYOG)試劑盒Anti-

詳細介紹

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產品名稱

規格

貨號

臺盼藍染色液

50ml

FS-R6662

產品分類:細胞染色

儲存條件:4℃,12個月

用途:又稱錐蟲藍染色液,用于細胞染色,細胞計數

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

金松雙黃(標準品) Benzyl acetateG蛋白偶聯受體18抗體包裝5g

金鐵鎖(標準品)  Bensulfuron-methylG蛋白偶聯受體65抗體包裝100ml

金銀花(標準品) Benazolin-ethyl ester生長終止特異性同源盒基因抗體包裝500ml

金櫻根(標準品) 3,4-Benzopyrene谷受體2抗體包裝100g

金櫻子(標準品)  (±)-1,3-Butanediol谷受體3抗體包裝25g

金盞銀盤(標準品) Butachlor solution谷受體4抗體包裝500g

筋骨草甾C Butachlor促代謝型谷受體1抗體包裝1g

錦燈籠(標準品) Butachlor solution甘受體α4抗體包裝250mg

京大戟(標準品) Butachlor solution生長分化因子8抗體包裝50mg

京平(標準品) Buturon磷化糖原合激-3β抗體包裝1g

京平甙(標準品) Bromopropylate solutionGlu-Glu tag抗體包裝25g

京平苷(標準品) Bromopropylate solution胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g

荊芥(標準品) Bronopol甘受體alpha 1/2/3型抗體包裝250mg

荊芥穗(標準品) Benfluralin抑制型G蛋白α3抗體包裝25g

九里香(標準品) Benzo(k)fluoranthene促性腺激釋放激受體抗體包裝5g

腐皮鐮孢Fusarium│solani 質量規格:>98%,培養級趨化因子配體17試劑盒牛磺鵝去氧膽 ;Taurochenod

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98%,BR趨化因子26試劑盒牛血清白蛋白;Bovine albumi

貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規格:HPLC>98%,標準品趨化因子2試劑盒耐斯糖;Nystose
臺盼藍染色液Klf4 (Kruppel likefactor 4)  腸道內富含的Kruppel樣因子抗原規格: 0.5mg

phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272)  磷suan化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗原規格: 0.5mg

phospho-Klf5/CKLF/Kruppel like factor 5, Human, mo, rat, horse, bovine, rabbit, pig, dog  磷suan化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗原規格: 0.5mg

LDH(Lactate Dehydrogenase)  乳suan脫氫mei抗原規格: 0.5mg

Leptin receptor(a、b、c、d)  瘦su受體抗原(長、中、短型)規格: 0.5mg

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5)   之后更換正常培養基培養即可。

 


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