快速組織固定液公司正在銷售的產品：雞纖維蛋白肽B(F)試劑盒 Anti-SMAD1/5 Antibody堿性磷酸酶（AP）標記的羊抗小鼠IgG
雞α1連接素(CTNNα1)試劑盒Anti-Smad1/5 AntibodyFITC標記的羊抗小鼠IgG
雞鈣調結合蛋白(CALD)試劑盒 Anti-SMAD2 AntibodyPE-Cy3標記的羊抗小鼠IgG
雞胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 An

產品分類：固定液

儲存條件：室溫,18個月

用途：用于新鮮組織樣本的固定。

注意事項：主要組成成份： 水溶性多元醇,甲醛、異丙醇、乙醇、甲醇

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

人參皂苷Rk1（標準品） Rebaudioside DMHC I類鏈相關蛋白B包裝5g

人參皂苷Rk2(標準品) Geraniin膜蛋白MLC1抗體包裝1g

人參皂苷RK3(標準品) Tyrosol磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝250mg

人參皂苷Ro（標準品） Triptophenolide磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝100g

人工虎骨（標準品） Celastrol絲/蘇蛋白激MLK3抗體包裝25g

（標準品） Triptolide磷化絲/蘇蛋白激MLK3抗體包裝500g

忍冬藤（標準品） Triptonide有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體包裝1g

絨毛龍芽草（標準品） Acteoside磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體包裝5g

鞣花(標準品) (-)-Licarin B磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體包裝1g

肉蓯蓉（標準品） Reserpine磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體包裝1g

肉蓯蓉（管花肉蓯蓉）（標準品） Roburic acid磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體包裝250mg

肉蓯蓉苷A(標準品) Phillyrin肌球蛋白磷抗體包裝5g

肉豆蔻（標準品） Forsythoside A磷化肌球蛋白磷抗體包裝25g

肉豆蔻木脂(標準品) Forsythoside B磷化肌球蛋白磷抗體包裝5g

肉豆蔻,十四烷(標準品) Liensinine磷化肌球蛋白磷抗體包裝100g

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>97.0%抗紡錘體抗體試劑盒豆甾;Stigmasterol

窄蓋針層孔菌Phellinus│tremulae (Bondartsev) Bondartsev & P.N. Borisov 質量規格：HPLC>97.0%,標準品抗二氫嘧啶相關蛋白5試劑盒膽固;Cholesterol

澳大亞平臍蠕孢Bipolaris│australiensis 質量規格：>97%抗多發性肌炎硬皮病抗體試劑盒單寧;Glycerite
快速組織固定液VEGF-R2  大鼠血管內皮生長因子受體2規格： 48T

UPAR  大鼠尿激mei樣纖溶mei原活化物受體規格： 48T

TH1/TH2  大鼠細胞內細胞因子規格： 48T

HLA-G  大鼠白細胞抗原G規格： 48T

CTGF  大鼠結締組織生長因子規格： 48T