BRL細胞培養

原代細胞傳代技術

一、貼壁細胞的消化法傳代 
1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。
2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。
3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。
4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。

二、懸浮細胞的傳代 
1、直接傳代
① 讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。
② 用吸管吹打形成細胞懸液后，分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中培養。
2、離心法傳代
① 將細胞連同培養液一并轉移到離心管內，離心800-1000rpm，5分鐘。
② 去除上清，加新的培養液到離心管內，用吸管吹打使之形成細胞懸液。
③ 將細胞懸液分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中培養。

牙髄細胞的傳代

牙髄細胞中主要是成纖維細胞，貼壁生長。

傳代方法：

棄培養液（盡量吸干）

加基礎培養基配置的0.2%trypsin+0.02%EDTA

輕輕翻轉培養瓶使消化液浸過有細胞的瓶壁

重復4～5次

迅速吸去消化液

鏡下觀察細胞變圓回縮（約1分鐘）

加入*培養液（DMEM+10% FCS）終止反應

吹打后，1:2接種，繼續培養。

大鼠系膜細胞傳代

我用的是DMEM低糖培養液，每次傳代前，將培養液，PBS，0.25％的胰酶（沒加edta）,放37度烤箱預熱（此做法是減少4度的涼液體對細胞的刺激，以防細胞死亡）。

每次換液時，一定要燒培養瓶口，做好無菌觀念。

先拋棄舊液，用PBS先沖凈殘留的血清，再加PBS用滴管輕輕的吹打細胞，將死細胞吹打掉。

加胰酶時注意：若用加edta的，記住了，在鏡下看到細胞在收縮時，趕快吸出胰酶，加血清中止消化。血清可抑制胰酶的活性，但對edta無效。前后大概不到10秒。若用沒有加edta的，時間要適當延長，看到細胞變為有立體感時，加血清，輕輕拍打，細胞就會散開。若團塊大，可用滴管吹打。

動作一點要快，不能讓細胞離開培養箱時間太長。

慧穎生物作為國內幾大生物試劑供應商，提供產品種類多，囊括：檢測試劑 、圖像光學 、免疫檢測 、生物器材 、原料試劑、檢驗醫技、抗原抗體、家用醫療、消耗材料、檢測治療、生物耗材等，公司坐落于上海眾仁路399號運通星財富廣場，公司交通便利，環境優雅，慧穎生物幾十名員工，熱烈歡迎您的參觀指導。
ATCC細胞|細胞培養技術|癌細胞|傳代細胞|復蘇細胞|國產細胞|進口細胞|人細胞株|凍存細胞|耐藥株
抗原抗體|動物疫病診斷試劑盒|酶免Elisa試劑盒
進口胎牛血清|Gibco血清|BOVOGEN血清|SERANA血清

C26小鼠結腸癌

C2C12小鼠成肌細胞

C-33 A人子宮頸癌

C3H小鼠胚胎成纖維細胞

C6大鼠腦膠質瘤細胞

Ca Ski人宮頸癌腸轉移細胞

Caco-2人結直腸腺癌細胞

CaKi-1人腎透明細胞癌細胞

CaKi-2人腎透明細胞癌細胞

CAL-27人舌鱗癌細胞

Calu-1人肺癌細胞

Calu-3人肺腺癌 (胸水)

Calu-6人退行性癌細胞

CaOV3人卵巢癌細胞

Capan1人胰腺癌細胞

Capan2人胰腺癌細胞

CaSki人宮頸腸轉移癌細胞

CBRH-7919大鼠肝癌細胞

CCD-1095Sk人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞

CCRF-CEM人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞

CEM/C1人急性淋巴細胞白血病細胞

CFPAC-1人胰腺癌細胞

Chang liver人張氏肝細胞

CHL倉鼠肺細胞

CHO中國倉鼠卵巢細胞

CHO/dhFr倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷

CHO-K1倉鼠卵巢細胞亞株

CL1人前列腺癌

CCRF-CEM人鼻咽癌細胞

CNE-2人鼻咽癌細胞

COLO 205人結腸癌細胞

COLO 320DM人結直腸腺癌細胞

COLO-704人卵巢癌細胞

COLO720E人卵巢癌細胞

COS-1非洲綠猴SV40轉化的腎細胞

COS-7非洲綠猴SV40轉化的腎細胞

COV362人卵巢癌細胞

COV434人卵巢癌細胞

COV504人卵巢癌細胞

COV644人卵巢癌細胞

CRFK貓腎細胞

CRL-9444人膜間皮細胞

CT-26小鼠結腸腺癌細胞

CT26.WT小鼠結腸癌細胞

CTLA4 Ig-24中國倉鼠卵巢細胞

CTLL-2細胞毒性T淋巴細胞

CV-1 非洲綠猴腎細胞

CW-2人結腸腺癌細胞

D407人視網膜色素上皮細胞

D6人肺腺癌

Dami人巨核細胞白血病細胞

Daudi人Burkitt's淋巴瘤細胞

DC2.4小鼠樹突狀細胞

DH82狗腎惡性組織細胞增生癥細胞

DLD-1人結直腸腺癌上皮細胞

DU145人前列腺癌

EA.hy926人臍靜脈細胞融合細胞

EBTr (NBL-4)牛胚氣管細胞

EC18人食管癌細胞

EC-9706人食管癌細胞

ECA小鼠艾氏腹水瘤細胞

ECA-109人食管癌細胞

ECV304人臍靜脈內皮細胞

ED-25人肝靜脈內皮細胞

EFO-21人卵巢癌細胞

EFO-27人卵巢癌細胞

EJ人膀胱癌細胞

EOMA小鼠血管瘤內皮細胞

ES-2人卵巢透明細胞癌

F81貓腎細胞

F9小鼠畸胎瘤細胞

FaDu人咽鱗癌細胞

FO小鼠骨髓瘤細胞

FRhK-4恒河猴胚腎細胞

GBC-SD人膽囊癌細胞

GES-1人胃黏膜上皮細胞

GLC82人低分化肺腺癌細胞

GRC-1人腎癌細胞

H128人小細胞肺癌

H1299人非小細胞肺癌

H22小鼠肝癌細胞

H292人肺癌細胞(淋巴結轉移)

H460人大細胞肺癌細胞

H466人小細胞肺癌

H69人小細胞肺癌

H9c2(2-1)大鼠心肌細胞

Hacat人正常皮膚細胞

HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮細胞

HBZY-1大鼠腎小球系膜細胞

HCC94人子宮鱗癌細胞（高分化）

HCC1937人乳腺癌細胞

HCC827人非小細胞肺癌細胞

HCCC-9810人膽管細胞型肝癌細胞

HCCLM3人高轉移肝癌細胞

HCCLMS人肝轉移癌

Hce-8693人盲腸腺癌細胞（未分化）

HCE-8962人盲腸未分化癌

HCT 116人結腸癌細胞

HCT-15人結直腸腺癌細胞

HCT-8人回盲腸腺癌細胞

HEB人腦膠質細胞株

HEC-1-A人子宮內膜腺癌細胞

HEC-1-B人子宮內膜腺癌細胞

HEEC人食道上皮細胞

HEK293-L人胚腎細胞

HEK293-T人胚腎細胞

HEL人紅白細胞白血病細胞

HELA人宮頸癌細胞

HeLa 229人宮頸癌細胞

hep 3B人肝癌細胞

Hep 3B2.1-7人肝癌細胞

Hep-2喉表皮樣癌

Hep3B人肝癌

Hepa 1-6小鼠肝癌細胞

Hep G2人肝癌細胞

HepG2.2.15人肝癌細胞

HFL1人胚肺成纖維細胞

hFOB 1.19人SV40轉染成骨細胞

HGC-27人胃癌細胞（未分化）

HHVEC肝瘤血管內皮細胞

HIC人小腸癌細胞

HK-2人腎小管上皮細胞

HKF人瘢痕疙瘩成纖維細胞

HL60急髓白血病細胞

HLamp人肺巨細胞癌細胞

HLEC人晶狀體上皮細胞

HLF人胚肺

HMy2.CIR人B淋巴母細胞

HNE-1人鼻咽癌細胞

HNE-2人鼻咽癌細胞

HO-8910人卵巢癌

HONE-1人鼻咽癌細胞

HPAC人胰腺癌細胞

Hs 578T人乳腺癌細胞

Hs766T人胰腺癌細胞