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Exosome是一種可由多種細胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡。經研究后發現,exosome其內含有*的蛋白質與核酸分子,exosome所含成份與其細胞來源密切相關,這也決定了exosome的功能特異性,如抗原提呈、信號傳導或誘導抗腫瘤免疫反應、細胞遷移、細胞分化、細胞間通信、腫瘤轉移等。目前,exosome研究已經成為臨床診斷與基礎醫生的新熱點。
近年來,exosome這種小囊泡正得到廣泛的關注。exosome天然存在于體液中,且攜帶了一些重要的信號分子,有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用,這使得exosome的市場也在快速擴展。zui近,GEN發布了有關exosome市場的分析報告,對其現狀和前景做了分析。這份報告由生物技術分析師Enal Razvi撰寫。
exosome是直徑約為30-150 nm的小囊泡,在30年前被人們所發現。早期的研究認為,exosome執行蛋白運輸功能,特異靶定受體細胞,交換蛋白和脂類或引發下游信號事件。直到2007年,研究人員發現exosome也運輸核酸,參與細胞間通訊。至此,這種小囊泡才被人重視,并成為熱門的研究對象。
exosome天然存在于所有體液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,且其蛋白、RNA和脂肪成分特異,因此,exosome有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。今年8月,美國NIH為24個細胞外(exRNA)通訊方面的研究項目提供1700萬美元的資助,主要關注exRNA作為潛在的生物標志物和療法的臨床實用性。
具體來說,exosome的研究方式是分離/捕獲小囊泡,并拷問它所攜帶的貨物。就目前而言,人們多采用超速離心、磁珠免疫捕獲、沉淀或過濾的方法,對exosome進行前期的分離。之后利用電鏡來分析其大小和形態,利用流式細胞儀來分析細胞表面標記,通過Western blot和ELISA等方法對蛋白進行分析,或通過qPCR和新一代測序(NGS)來分析RNA。
調查發現,在分離exosome時,約有56%的人采用超速離心法,說明這種方法仍是目前的金標準方法。不過,生物通之前也介紹過,這種方法缺點也不少:耗時耗力,往往需要8-30個小時;每次zui多只能處理6個樣品;需要大量的起始材料;產量不高。商業化的exosome提取試劑盒已經上市,更為簡單省事。
在下游分析方面,36%的研究人員通過Western blot或其他方法來鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對microRNA表達譜進行分析,9%利用芯片進行microRNA表達譜分析。同時,新一代測序的用戶也不少,13%的人員利用NGS開展microRNA/小RNA研究,9% 開展mRNA研究。
此外,目前的大部分工作還是停留在科研階段,后續的生物標志物開發和驗證不多,而診斷和療法的開發就更少。
Razvi認為,exosome的定性和定量研究是個快速發展的市場。同時,循環生物標志物的市場也存在著機遇和挑戰。不過,無創產前檢測技術的成功讓人們相信,循環生物標志物有望在腫瘤及其他疾病的診斷上發揮作用。
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