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產(chǎn)品應(yīng)用:僅供科研使用,不用于臨床研究。
用途:采用雙抗夾心法或雙位點(diǎn)一步法定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織液、細(xì)胞上清液或其相關(guān)體液中LRP-6的含量。
一、雙抗夾心法
雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法,但僅適用于2價(jià)或2價(jià)以上抗原的檢測(cè),而不適用于小分子抗原或半抗原物質(zhì)的測(cè)定。其測(cè)定原理是將特異性抗體包被于固相載體上,形成固相抗體;加入含待測(cè)抗原的樣品,使之與固相抗體結(jié)合;再加入酶標(biāo)記的另一特異性抗體,使酶標(biāo)抗體與固相免疫復(fù)合物中的抗原結(jié)合;zui后加入底物顯色。溶液顏色的深淺與標(biāo)本中待測(cè)抗原的量成正比。
二、雙位點(diǎn)一步法
雙位點(diǎn)一步法是在雙抗體夾心法的基礎(chǔ)上改進(jìn)而來(lái)的,應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同表位的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,在測(cè)定時(shí)可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體同時(shí)加入。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)化了操作,縮短了反應(yīng)時(shí)間,而且由于使用了高親和力的單克隆抗體,測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高;缺點(diǎn)是當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高,大大超過(guò)了固相抗體的結(jié)合能力時(shí),可能出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)(hook effect),即過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,測(cè)得結(jié)果將低于實(shí)際含量,嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性。
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