慧穎生物專業供應人GOD試劑盒,葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒;檢測目的:測量人血清、血漿、組織、細胞上清液等GOD含量水平的表達。 檢測方法:ELISA(雙抗一步夾心法)快速、精準。 規格:48T/96T 試劑盒組成成分:微孔酶標+標準品+樣本稀釋液+標準品+樣本稀釋液+檢測抗體-HRP+20×洗滌緩沖液+底物A 底物B+終止液+封板膜+說明書+自封袋 慧穎生物公司以信譽求發展,以品質贏得信賴,自公司成立來,為大中院校、醫院、醫藥企業單位提供上百萬ELISA試劑盒,慧穎生物ELISA試劑盒指標齊全,囊括1、細胞因子檢測試劑盒:2、肝纖維化檢測elisa試劑盒:3、心肌梗塞檢測elisa試劑盒 :4、內分泌檢測elisa試劑盒:5、自身免疫檢測elisa試劑盒6、腫瘤標志物檢測elisa試劑盒: 7、優生優育檢測elisa試劑盒:8、傳染病檢測elisa試劑盒141、特種蛋白檢測elisa試劑盒二、食品安全檢驗 elisa試劑盒:三、植物病毒、細菌、真菌、植物激素和轉基因作物的農業診斷試劑盒四、動植物疾病診斷類如 豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒。本公司承諾,凡屬我公司試劑盒質量問題,我們包退換,敬請老師們放心使用。全國統一訂購: ! 人GOD試劑盒,葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒 詳細說明書(原理/樣本處理要求/操作步驟/注意事項/計算方法等) 檢測原理 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被葡萄糖氧化酶(GOD)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葡萄糖氧化酶(GOD)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。 樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘 取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 自備物品 1. 酶標儀(450nm) 2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3. 37℃恒溫箱 操作注意事項 1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。 2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。 3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5 倍,zui終結果乘以5 才是樣本實際濃度。 4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。 5. 所有液體組分使用前充分搖勻。 試劑盒組成 名稱96孔配置48孔配置備注 微孔酶標板12 孔×8 條12 孔×4 條無 標準品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無 標準品稀釋液6mL 3mL 無 樣本稀釋液6mL 3mL 無 檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無 20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說明書進行稀釋 底物A 6mL 3mL 無 底物B 6mL 3mL 無 終止液6mL 3mL 無 封板膜2 張2 張無 說明書1 份1 份無 自封袋1 個1 個無 注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、0.5、1、2、4、8 ng/mL 試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20 稀釋,即1 份的20×洗滌緩 沖液加19 份的蒸餾水。 洗板方法 1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5 次。 2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。 操作步驟 1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設置標準品孔和樣本孔。標準品孔各加不同濃度的標準品50μL; 3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5 次(也可用洗板機洗板)。6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入終止液50μL,15min 內,在450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 結果判斷 繪制標準曲線:在Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。 試劑盒性能 1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R 值,大于等于0.9900。 2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。 3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。 4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。 5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。 6. 有效期:6 個月 免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。