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小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒

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小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa試劑盒酶標(biāo)儀的使用過(guò)程中的一些問(wèn)題:
1.閾值可疑范圍的設(shè)定 一般酶標(biāo)儀閾值矩陣設(shè)定可設(shè)定陰性、可疑、陽(yáng)性3個(gè)范圍。有經(jīng)驗(yàn)表明可疑范圍的設(shè)定要設(shè)定為臨界上下15%(也稱灰色區(qū))為宜;同時(shí)陰性范圍下限和陽(yáng)性范圍應(yīng)該充分考慮到影響ELISA結(jié)果因素的存在,可疑范圍上限必須考慮到雙波長(zhǎng)情況下出現(xiàn)負(fù)吸光度值和超范圍報(bào)告影響結(jié)果的可能性。“灰色區(qū)"的結(jié)果的真實(shí)性是ELISA定性測(cè)定中zui需要把握的環(huán)節(jié),也是實(shí)驗(yàn)室引起醫(yī)療糾紛的主要方面,因此必須對(duì)可疑結(jié)果進(jìn)行復(fù)檢,用兩種試劑盒。
2.樣板程序文件設(shè)定 一個(gè)實(shí)驗(yàn)室同一試驗(yàn)可能使用不同廠家試劑盒,但不同試劑盒規(guī)定的設(shè)定對(duì)照數(shù)量、閾值判定標(biāo)準(zhǔn)等均可能不*,酶標(biāo)儀所設(shè)樣板程序也不*。為了使用方便,可在樣板程序文件中用后綴加以區(qū)別。

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