WESTERN BLOT 膜再生液
貨號:SW3020
規(guī)格:100 ML / 500 ML
保存:室溫保存,一年有效。
產(chǎn)品簡介:
使用膜再生液可以對同一張膜進(jìn)行多次 WESTERN BLOT 檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液 10-60 分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪 WESTERN BLOT 實(shí)驗(yàn)。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一 張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差, 使可比性更強(qiáng)。
WESTERN BLOT 膜再生液特點(diǎn)是:無毒無味無害,室溫下使用,室溫下保存;可對同一張膜進(jìn)行 5 次以上的
WESTERN BLOT 檢測。
WESTERN BLOT 膜再生液適用:清除硝酸纖維素膜或 PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
使用方法:
- 將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,室溫洗脫 10-20 分鐘,時間長短應(yīng)該參考注意事項(xiàng)進(jìn)行優(yōu)化, 洗脫某些抗體需較長時間,更有長達(dá) 60 分鐘之久。
- 取出膜,用洗滌液(如 TBST 等)漂洗兩次。
- 此時膜上抗體已除去,可重新封閉后再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。
注意事項(xiàng):
- 膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實(shí)際操作中,膜類型、抗體類型、 濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
- 適用于 ECL 和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 WESTERN 檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 WESTERN
檢測,例如 DAB,NBT/BCIP。
- 用 ECL 顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入 ECL 顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體 未除凈,須進(jìn)一步在再生液中浸泡,至膠片上無顯色。
- 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用 BSA 封閉的膜更容易再生。
- 盡量避免讓膜干燥。
相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
PR1800 | Western blotting蛋白MARKER | 10T/20T | 120/230 |
PE0010 | ECL Plus熒光檢測試劑(ECL超敏發(fā)光液) | 25ml | 240 |
A1010 | 30%丙烯酰胺 (29:1) | 100ml/500ml | 60/180 |
P1015 | 4×蛋白上樣緩沖液(含DTT) | 10ml | 160 |
T1080 | 20×TBS | 500ml | 80 |