BALL-1細胞,人B淋巴細胞白血病細胞簡介:
細胞株名稱:BALL-1,人B淋巴細胞白血病細胞
種屬:人
生長特性:懸浮生長
形態特征:淋巴細胞樣
微生物及支原體檢測:陰性
細胞背景:該細胞系來源于一典型的人B淋巴細胞白血病病人。
來源:日本INKEN中心
安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。
BALL-1細胞,人B淋巴細胞白血病細胞培養條件:
*培養基:90%1640+10%胎牛血清
血清我們推薦用:
BOVOGEN 胎牛血清 貨號:SFBS。
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
BALL-1細胞,人B淋巴細胞白血病細胞傳代方法:
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,先不要把培養基吸出來。應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水。噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作:然后打開蓋子,先用槍頭把培養基吸出10ML左右,放在離心管里,然后瓶口過火,(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ML的移液管,將剩余的培養基全部吸出,放于離心管中,培養瓶中只剩余5-10ML左右培養液繼續培養就可以了):超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。
如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心3-5分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4,將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。第二天換液時,要配制新鮮的培養基和進口胎牛血清。這樣對細胞生長更好。不要再用我們原瓶的培養基了。
5 、24小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液和進口胎牛血清,37度 5%CO2 培養
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
BALL-1細胞,人B淋巴細胞白血病細胞凍存方法:
凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO
儲存:液氮儲存