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H3255細(xì)胞價格NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株

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產(chǎn)品型號:

品       牌:ATCC

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

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H3255細(xì)胞價格NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株 ;美國ATCC引進(jìn),傳代次數(shù)少,*。由上海慧穎生物提供,供應(yīng) H3255細(xì)胞的價格、復(fù)蘇服務(wù)、技術(shù)咨詢、操作注意事項、組織來源、特征特性、復(fù)蘇周期、耐藥細(xì)胞定制等服務(wù),*,確保售后,咨詢!

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【中文名稱】人肺癌細(xì)胞株

【英文名稱】NCI-H3255或H3255

【來源】美國ATCC

【代數(shù)】3-5代

【細(xì)胞檢測】細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

【細(xì)胞凍存】液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS

【細(xì)胞運(yùn)輸】干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)

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注意,新復(fù)蘇的細(xì)胞不要經(jīng)常去看去動。

換液的話,只要把培養(yǎng)基吸出,再加入新的培養(yǎng)基就可以了

如果復(fù)蘇的細(xì)胞長得很不均勻,可以胰酶消化下來再混勻后在重新加進(jìn)去(像正常細(xì)胞一樣做)

復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。

  收到細(xì)胞株包裹時, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。

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冷凍細(xì)胞解凍程序:

依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例, 制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類, 若因?qū)嶒炐枰?必須有所不同時, 務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成, 確定細(xì)胞適應(yīng)后, 方進(jìn)行所需之實(shí)驗。

FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。

將培養(yǎng)基置于 37 °C水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之, 移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管, 立即放入37 °C 水槽中快速解凍, 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿, 否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部, 移入無菌操作臺內(nèi)。

依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基, 混 合均勻,放入37 °C,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1 % 以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO 者, 則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,離心300 xg (約1000 rpm),5 分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后, 轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中, 再放入37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。收到T25 flask 細(xì)胞時, 處理方式為︰

1. 于寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask 外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題, 不要打開蓋子,請立即通知細(xì)胞實(shí)驗室。

2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37 °C, 并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基,(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),依 一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中或細(xì)胞已長滿盤, 則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。

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