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產(chǎn)品名稱:HL-7702
中文名稱:人肝細胞
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
細胞規(guī)格:株
質(zhì)控標準:無支原體、無污染、符合標準
運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸
貨期:新鮮運輸需要1-2周,凍存管運輸?shù)男枰?-3天
,質(zhì)粒的相關(guān)知識:
一.如何閱讀質(zhì)粒圖譜
*步:首先看 Ori 的位置,了解質(zhì)粒的類型(原核/真核/穿梭質(zhì)粒)。
第二步:再看篩選標記,如抗性,決定使用什么篩選標記。
--Ampr 水解β-內(nèi)酰胺環(huán),解除氨芐的毒性;
--tetr 可以阻止四環(huán)素進入細胞;
--camr 生成氯霉素羥乙?;苌?,使之失去毒性;
--neor(kanr)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 使G418(長那霉素衍生物)失活;
--hygr 使潮霉素β失活。
第三步:看多克隆位點(MCS)。它具有多個限制酶的單一切點,便于外源基因的插入。如果在這些位點外有外源基因的插入,會導致某種標志基因的失活,從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源DNA插入片段大小。質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段。一般來說,外源DNA片段越長,越難插入,越不穩(wěn)定,轉(zhuǎn)化效率越低。
第五步:是否含有表達系統(tǒng)元件,即啟動子-核糖體結(jié)合位點-克隆位點-轉(zhuǎn)錄終止信號,這是用來區(qū)別克隆載體與表達載體。在克隆載體中加入一些與表達調(diào)控有關(guān)的元件即成為表達載體。選用哪種載體,要以實驗?zāi)康臑橐罁?jù)。
二.如何選擇載體
把目的基因通過基因工程手段送到生物細胞(受體細胞),需要運載工具(交通工具)攜帶外源基因進入受體細胞,這種運載工具就叫做載體(vector)。基因工程所用的vector實際上是用來攜帶目的基因片段進入受體細胞的 DNA。
選擇載體主要依據(jù)構(gòu)建的目的,同時要考慮載體中應(yīng)有合適的限制酶切位點。如果構(gòu)建的目的是要表達一個特定的基因,則要選擇合適的表達載體。
載體選擇主要考慮下述3點:
1. 構(gòu)建DNA重組體的目的:克隆載體/表達載體。
2. 載體的類型:
克隆載體的克隆能力:根據(jù)克隆片段大?。ù筮x大,小選小)。如<10kb選質(zhì)粒。
表達載體:根據(jù)受體細胞類型:原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳類細胞表達載體。
原核表達載體要選擇合適的啟動子及相應(yīng)的受體菌;表達真核蛋白時需注意閱讀框錯位問題;表達天然蛋白和融合蛋白所需載體亦有區(qū)別。
3. 選用質(zhì)粒做載體的4點要求:
(1)選分子量小的質(zhì)粒,即小載體(1~1.5 kb):不易損壞,在細菌里面拷貝數(shù)也多(也有大載體);
(2)一般使用松弛型質(zhì)粒在細菌里擴增不受約束,一般10個以上的拷貝,而嚴謹型質(zhì)粒<10個。
(3)必需具備一個以上的酶切位點,有選擇的余地;
(4)必需有易檢測的標記,多是抗生素的抗性基因。
無論選用哪種載體,首先都要獲得載體分子,然后采用適當?shù)南拗泼笇⑤d體DNA進行切割,獲得載體片段,以便于與目的基因片段進行連接。
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血清介紹:
產(chǎn)品名稱 貨號 來源 規(guī)格 市場價格 備注
胎牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML 1100 較貴細胞,原代、腫瘤細胞均可
胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML 2500 較貴細胞,原代、腫瘤細胞均可胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML 4800 胚胎干細胞,神經(jīng)類、昆蟲、哺乳細胞等
超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML 5200
透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML 5800
活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML 5800
備注:SERANA血清生產(chǎn):
SERANA血清生產(chǎn)原料均符合FDA及EC標準,公司通過了ISO9001認證。絕大多數(shù)來源的FBS通過EDQM(歐洲藥品質(zhì)量管理局)認證。
完整可追溯性:從血清原料的收集直至zui終無菌過濾的產(chǎn)品,SERANA管理并記錄了所有相關(guān)的進程。這保證了從動物源直到終產(chǎn)品的完整可追溯性。SERANA為所有的客戶提供完整全面的批次記錄,包括原產(chǎn)地證明、健康證明、分析證書和其他批簽發(fā)記錄。
血清產(chǎn)品的檢測和測試:胎牛采集血清前,懷孕胎牛會按歐洲EU Regulation 999/2001規(guī)定進行BSE檢測,只有BSE檢測陰性的才被采集;胎牛血清經(jīng)3次100納米過濾,經(jīng)BVD、IBR、PI3等病毒檢測;細菌、真菌、支原體檢測;每一批胎牛血清都經(jīng)生長測試和克隆率測試,測試細胞包括:HeLa, L929, SP2/O-AG14, MRC-5,CHO and BHK。SERANA胎牛血清的內(nèi)毒素含量非常低,有些批次甚至低于0.02 EU/ml。
樣品的供應(yīng)和批號的保留:SERANA血清會按客戶的需求提供2-3個不同批次規(guī)格為50ml的免費樣品供客戶篩選,篩選合格的批次,SERANA會為客戶免費儲存12-18個月。
以上只是慧穎生物的部分細胞產(chǎn)品,若沒發(fā)現(xiàn)您需要的產(chǎn)品請,慧穎生物還提供各種菌株,血清,培養(yǎng)基,染色液,藥敏試劑,藥敏試紙,藥敏試條,基因檢測,凝膠過濾填料等實驗室用品,詳詢。