小鼠 resistin ELISA試劑盒|KIT說明書
本試劑盒僅供科研使用。用于體外定量檢測豬血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-1β濃度。源于慧穎生物
小鼠 resistin ELISA試劑盒|KIT說明書簡介:
小鼠抵抗素,也叫脂肪組織分泌因子,是由二硫鍵鏈接的二聚體蛋白,由脂肪組織分泌的屬于抵抗素家族的激素,能抑制胰島素降解血液中糖的作用,在II型糖尿病和肥胖癥中起重要作用。在小鼠體中,有報道稱抵抗素由由前脂肪細(xì)胞、胎盤、胰島、白血病細(xì)胞、血液中單核細(xì)胞類等分泌。小鼠抵抗素的前體蛋白由114個氨基酸組成,包括94個氨基酸的成熟蛋白和20個氨基酸的信號肽。成熟的小鼠抵抗素蛋白序列中包括N末端的信號序列和含11個半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域。除了抑制胰島素的作用,一些報道也表明小鼠抵抗素對一些炎癥反應(yīng)前期細(xì)胞因子也有調(diào)節(jié)作用,包括白介1、白介6、白介12,也促進(jìn)VCAM-1、ICAM-1、MCP-1等的上調(diào)。
檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中resistin的濃度。resistin的捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時,其中的resistin的會與捕獲抗體結(jié)合,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠resistin的抗體后,抗小鼠resistin的抗體與resistin的接合,形成夾心的免疫復(fù)合物,其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合,親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來;其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。zui后加入顯色劑,若樣本中存在resistin將會形成免疫復(fù)合物,辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過酶標(biāo)儀檢測,讀其450nm處的OD值,resistin的濃度與OD450值之間呈正比,通過參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對照未知樣本中OD值,即可算出標(biāo)本中resistin的濃度。
產(chǎn)品供應(yīng)商:上海慧穎生物科技有限公司
1-2個工作日發(fā)貨,提供免費(fèi)代測服務(wù),收到標(biāo)本起一周內(nèi)提供原始數(shù)據(jù)和zui終數(shù)據(jù)
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法:
1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2 h或4℃過夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3. 尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
4. 唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復(fù)凍融。
ELISA試劑盒常見問題及分析
問題分析
若試驗(yàn)效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保留未用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后我公司為你解決問題。同時您也可以參考以下資料:
問題描述 | 可能原因 | 相應(yīng)對策 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差 | 吸液或加液不準(zhǔn) | 檢查移液器及吸頭 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確 | 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時,反復(fù)吹打,確保*混勻 | |
洗滌不* | 保證洗滌時間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量 | |
顯色很弱或無色 | 孵育時間太短 | 保證充足的孵育時間 |
實(shí)驗(yàn)溫度不正確 | 使用推薦的實(shí)驗(yàn)溫度 | |
試劑提及不夠或漏加 | 檢查洗液及加液過程,保證所有試劑按順序足量添加 | |
稀釋不正確 | ||
讀數(shù)數(shù)值低 | 酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 | 在酶標(biāo)儀上檢查波長及濾光片設(shè)置 |
提前打開酶標(biāo)儀預(yù)熱 | ||
變異系數(shù)大 | 加液不正確 | 檢查加液情況 |
背景值高 | 檢測抗體的工作濃度 | 使用推薦的稀釋倍數(shù) |
酶標(biāo)板洗滌不* | 重新閱讀操作手冊,保證清洗*;如果用自動洗板機(jī), 請檢查所有的出口是否有堵塞 | |
洗液有污染 | 配置新鮮的洗液 | |
靈敏度低 | ELISA試劑盒保存 | 按照說明書要求保存相關(guān)試劑 |
讀數(shù)前未終止 | OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液 |
Human IL-8 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素8 96T/48T
Human IL-10 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素10 96T/48T
Human IL-17 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素17 96T/48T
Human IFN-γELISA KIT 人的伽馬干擾素 96T/48T
Human TNF-αELISA KIT 人的腫瘤壞死因子阿法 96T/48T
Human Adiponectin ELISA KIT 人的脂聯(lián)素 96T/48T
Human MMP-2 ELISA KIT 人的金屬蛋白酶2 96T/48T
Human BMP-2 ELISA KIT 人的骨形成蛋白2 96T/48T
Human IL-9 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素9 96T/48T
Human IL-18ELISA KIT 人白細(xì)胞介素18 96T/48T
Human IL-21ELISA KIT 人白細(xì)胞介素9 96T/48T
Human CRP ELISA KIT 人C反應(yīng)蛋白 96T/48T
Human BMP-6 ELISA KIT 人骨形成蛋白6 96T/48T
Human CCL2/MCP-1 ELISA KIT 人的單核細(xì)胞趨化蛋白1 96T/48T
Human IL-1β ELISA KIT 人白細(xì)胞介素1貝塔 96T/48T
Human IL-4 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素4 96T/48T
Human IL-6 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素6 96T/48T
Human TGF-β1 ELISA KIT 人的轉(zhuǎn)化生長因子貝塔1 96T/48T
Human VEGF ELISA KIT 人的血管內(nèi)皮生長因子 96T/48T
JEH-012 Human Leptin ELISA KIT 人的瘦素 96T/48T
Human IL-1αELISA KIT 人白細(xì)胞介素1阿法 96T/48T
Human IL-2 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素2 96T/48T
Human IL-13 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素13 96T/48T
Human G-CSF ELISA KIT 粒細(xì)胞集落刺激因子 96T/48T
Human GM-CSF ELISA KIT 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 96T/48T
Human IL-5 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素5 96T/48T
Human MMP-9 ELISA KIT 人的金屬蛋白酶9 96T/48T
Human TIMP-1 ELISA KIT 金屬蛋白酶組織抑制因子 96T/48T
Human SCF ELISA KIT 人的干細(xì)胞因子 96T/48T
Human KGF/FGF-7 ELISA KIT 人的纖維生長因子7/角蛋白檢測試劑盒 96T/48T
Human IL-22 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素22 96T/48T
Human IGF-1 ELISA KIT 人的胰島素樣因子1 96T/48T
Human CCL19/ MIP-3 ELISA KIT 人的巨噬細(xì)胞炎癥蛋白3貝塔 96T/48T
Human CCL21/6Ckine ELISA KIT 人的次級淋巴組織趨化因子 96T/48T
Human TREM 1 ELISA KIT 人的髓系細(xì)胞觸發(fā)受體 96T/48T