Gemini血清900-108優等FBS
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發育,這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采自出生一天~一周內的新生牛;
小牛血清(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
成牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。
所有血清出廠前均應經過嚴格質控,并附詳細《檢測報告》,
如pH值、滲透壓、內毒素、病毒檢測、促細胞生長能力、無菌等檢查。
其中,由于內毒素直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血清,內毒素差異又不易控制。
內毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:
當血清中內毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;
當血清中內毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優級胎牛血清;
當血清中內毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;
胎牛血清 在細胞培養中的作用:
1. 提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。
3. 有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余yi danbaimei失活,保護細胞不受傷害。
7. 參與細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養基的成分來確定最佳濃度。
胎牛血清產品描述:
胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和ning xue yinzi。
胎牛血清在細胞培養方面通常優于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養細胞發生交叉反應的風險也較低,是理想的細胞生長補充劑。
所有胎牛血清均在當地政府獸醫部門的監督下從注冊的出口屠場采集,符合國際動物協會要求。
為避免不同供體間的個體差異,能夠更好保證實驗數據的連續性和穩定,應使用同批次血清。
同批次血清:將經過初步檢測合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無菌過濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質量上基本無差異。不同廠家一個批次產量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗的穩定和連續的可參照性。
所有血清出廠前,均經過嚴格質控,每個批次附有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產日期,保質期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應等)、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。
胎牛血清儲存條件:
-20°C凍存。
胎牛血清解凍后,應按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。
若置于4°C的血清,應在一周內用完。
為保證細胞培養的最佳效果,血清和培養基的配置,應遵循“現用現配"原則。配好的培養液,應于一周內用完。
血清避免反復凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質。
胎牛血清是否要熱滅活:
shouxian胎牛血清不推薦熱滅活。
熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。
在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統,因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。
并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養效果。
若針對某些特殊試驗,對于胎牛血清一定要做熱滅活,國際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。
胎牛血清融化方法:
血清融化 專業方法:
目的;更好保留血清中活性成分,使細胞培養更穩定。
推薦國際血清廠家 專業融化方法(此方法國際通用,適用于所有種類的血清):
操作 | 溫度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
第一步 | 室溫 | 35 min | 90 min | 100 min |
或15-20℃水浴 | 5 min | 18 min | 20 min | |
第二步 | 20℃水浴 | 15 min | 25 min | 30 min |
第三步 | 37℃水浴 | 20 min | 35 min | 45 min |
注意:
?在水浴過程中,血清的平面要沉浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動中盡量不要產生泡沫!
胎牛血清 使用說明
血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入到基礎培養基中,混勻,制備成新鮮培養基。(整個操作需在無菌超凈臺中進行,注意無菌操作。)配置好的培養基推薦在4℃保存,應在1周內用完。
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