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上海士鋒生物科技有限公司

ELISA試劑盒,進口,中檢所標(biāo)準(zhǔn)品,生物試劑,培養(yǎng)基,中間體

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BIOTANG高效電動乳化器

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  • 上海士鋒生物科技有限公司
  • 2016-06-27 19:27:59
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【簡單介紹】

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【詳細說明】

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規(guī)格:20MG

庫存:廠家現(xiàn)貨

用途:科研試驗

保存條件:低溫避光

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公司合作伙伴:中科院化學(xué)研究所,清華大學(xué),南開大學(xué),燕山大學(xué),第三軍醫(yī)大學(xué),山東魯南制藥,深圳海王藥業(yè),修正集團,康師傅集團等。

鄭重承諾:凡是購買公司產(chǎn)品,出現(xiàn)質(zhì)量問題,無條件退貨退款。

操作步驟
  方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.6 碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:
  用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
  加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔 中,置37℃孵育1小時,洗滌。
  同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml, 37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
  其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6
。
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