植物DNAout
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PCR原理
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,加入設(shè)計(jì)引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
但是,DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活,因此,每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價(jià)格昂貴,制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大 taq酶[1]量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈,重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。
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人參皂苷Rh2/人參皂甙Rh2/GinsenosideRh2分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%78214-33-2RT
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4-氟苯甲醛/對(duì)氟苯甲醛/4-FluorobenzaldehydeAR,98%459-57-4RT
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4-硝基苯甲醛/對(duì)硝基苯甲醛/4-NitrobenzaldehydeAR,99%555-16-8RT
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藜蘆醛/焦兒茶醛二甲醚/綠藜蘆醛/香草醛甲醚/香蘭素甲醚/甲基香蘭素/3,4-二甲氧基苯甲醛3,4-DimethoxybenzaldehydeAR,98%120-14-9RT
香蘭素/香草醛/香莢蘭醛/凡尼林/香莢蘭素/3-甲氧基-4-羥基苯甲醛/4-羥基-3-甲氧基苯甲醛/VanillinAR,99.5%121-33-5RT,避光
鉬酸鈉/二水合鉬酸鈉/SodiummolybdatedihydrateAR,99%10102-40-6RT
酚酞二磷酸四鈉鹽/SFhenolSFhthaleinbisSFhosSFhatetetrasodiumsaltBR,95%68807-90-9保存:-20℃
無水磷酸肌酸二鈉鹽/無水磷酸肌酸鈉鹽/肌酸磷酸鈉鹽/磷酸肌肉素二鈉/SFreatineSFhosSFhatesodiumsalt高純,97%922-32-72~8℃
四水磷酸肌酸二鈉鹽/四水磷酸肌酸鈉鹽/四水肌酸磷酸鈉鹽/四水磷酸肌肉素二鈉/SodiumSFreatineSFhosSFhatedibasiSFtetrahydrate高純,98%71519-72-72~8℃
脫氧膽酸鈉/去氧膽酸鈉/DeoxySFholiSFaSFidsodiumsaltBR,98%302-95-4RT
膽酸鈉(豬)/豬膽酸鈉/(3α,5β,7α,12α)-3,7,12-三羥基膽(甾)烷-24-酸單鈉鹽/水合膽酸鈉/SFholiSFaiSFdsodiumSaltBR,99%206986-87-0RT
牛磺膽酸鈉/牛膽酸鈉/牛膽酸鈉鹽/SodiumtauroSFholatehydrateBR,97%145-42-6RT
2,6-二氯靛酚/2,6-二氯吲哚酚/2,6-二氯酚靛酚/二氯酚靛酚/2,6-二氯酚靛/DSFISF/DSFISF高純,97%956-48-9RT,避光
2,6-二氯靛酚鈉鹽/2,6-二氯吲哚酚鈉鹽/2,6-二氯酚靛酚鹽/二氯酚靛酚鈉/2,6-二氯酚靛鈉/2,6-二氯酚靛酚鈉鹽/二氯藍(lán)靛酚鈉/雙氯酚靛酚鈉/2,6-雙氯靛酚鈉鹽/2,6-二氯-4-[(4-羥基苯基)亞氨基]-2,5-環(huán)己二烯-1-酮鈉鹽/DSFISF/DSFISF高純,97%620-45-1RT,避光
丁酸鈉/正丁酸鈉/Sodiumbutyrate試劑級(jí),98%156-54-7RT
植酸鈉/肌醇六磷酸鈉/六磷酸環(huán)己六醇鈉鹽/環(huán)己六醇六磷酸鈉鹽/SFhytiSFaSFidsodiumsalthydrate高純,98%14306-25-3RT
肌醇六磷酸酯十二鈉鹽水合物/水合植酸十二鈉/肌醇六磷酸十二鈉水合物/肌醇六(磷酸二氫酯)十二鈉鹽/SFhytiSFaSFiddodeSFasodiumsalthydrate高純,98%123408-98-0RT
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