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Edu細胞增殖檢測/細胞增殖實驗

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更新時間:2017-08-02 13:35:49瀏覽次數:5342次

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Edu細胞增殖檢測/細胞增殖實驗
EdU可以在DNA復制的時候摻入到新合成的DNA鏈中,通過一個“Click"反應,把熒光基團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣我們就能通過檢測熒光而知道細胞的增殖情況了。

 

Edu細胞增殖檢測

EdU可以在DNA復制的時候摻入到新合成的DNA鏈中,通過一個“Click”反應,把熒光基團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣我們就能通過檢測熒光而知道細胞的增殖情況了。
 
操作步驟
1. 細胞培養:取對數生長期細胞,以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中,培養至正常生長階段
2. 藥物處理:根據實驗需要進行各種藥物處理
3. EdU標記:用細胞培養基按1000:1的比例稀釋EdU溶液 (試劑A),制備適量50μM EdU培養基;
 注:1)EdU濃度與孵育時間相關,短時間孵育(<2h)宜采用高濃度(10~50 μM),長時間孵育(>24h)宜采用低濃度             (1~10μM);        
   a.如果需配置10μM EdU培養基,需調整為5000:1稀釋比例;          
   b.配置好的培養基的保存時間取決于培養基的性質。
4. 細胞固定
5. Apollo染色
6. 圖像獲取及分析

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2.提供新鮮的培養細胞,提供新鮮組織,需要實驗室制備成單細胞懸液。
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