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細胞培養中支原體污染的預防——培養箱及水源支原體噴霧試劑
閱讀：2364發布時間：2014-6-12
支原體（Mycoplasma）是一種大小介于細菌和病毒之間(zui小直徑0．2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體是目前已知一類能在無生命培養基上生長繁殖的zui小的原核細胞型微生物。支原體無細胞壁，其形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和細胞之間。
細胞培養（特別是傳代細胞）被支原體污染是個世界性問題。國內外研究表明，95%以上是以下四種支原體：口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）和菜氏無膽甾原體（A.laidlawii），為牛源性。國外調查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。
支原體污染的來源包括工作環境的污染、操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）、培養基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污 染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。其中具體到細胞培養的實驗室里，主要是操作環境、培養基和血清內的污染，以及實驗室之間、細胞株之間的交叉污 染。由于支原體能夠透過濾膜，因此在使用一些通過過濾滅菌的試劑上，如果試劑本身帶有支原體污染，則很容易造成支原體污染的傳播。其中細胞培養接觸水源是 支原體zui容易傳播和交叉污染的地方，也是實驗室消毒zui難處理的地方，這里包括細胞培養箱產生的氣霧、培養箱內水源以及水浴鍋等設備，AppliChem了專業針對水池抗支原體污染的系列產品。用于容器表面的消毒, 以及二氧化碳培養箱蓄水槽, 各種水箱, 及清洗用水池的消毒。
Incubator-Clean (目錄號：A5230)產品轉為細胞恒溫培養箱及其他儀器表面支原體消毒，能有效預防真菌（及孢子）、細菌（及桿菌孢子）、支原體以及病毒污染（包括HIV和 乙肝病毒）。該試劑活性成分為四芐基胺化合物，試劑不含汞、甲醛、苯酚和乙醇等細胞毒物質，更重要的是，該消毒試劑對細胞無毒副作用，并且是生物可降解 的，試驗結果發現，該支原體消毒劑也可用于容器表面，作為噴霧劑使用。可以每兩周噴灑一次細胞培養箱，對于常用的器材可以每周一次，建議實驗人員使用前噴 灑。
Incuwater-Clean (目錄號：A5219)則用于細胞培養箱內的水源消毒，該支原體預防試劑為100X濃縮液，直接稀釋進水源使用，能有效殺滅并預防水源內的支原體污染，該試劑無毒，無揮發性，并且不會腐蝕金屬表面。使用時用無菌水稀釋100倍，每2-4周更換新液。
Aquabator-Clean (目錄號：A5225)產品用于水浴鍋等水浴裝置，專門對裝置內水源進行消毒，每1升水中加2毫升試劑，按此比率，每周向水源中添加2毫升Aquabator-Clean，4-6周換更換新液。該試劑無毒，安全可降解（注，Aquabator-Clean不能用于恒溫培養箱內水源）
產品名稱（貨號） | 產品說明 |
Incubator-Clean(A5230) | 用于容器表面的消毒, 每天噴灑工作臺, 門窗等, 每兩周噴灑細胞培養箱, 預防真菌, 細菌, 支原體, 病毒(如HIV, HBV) 等污染, 活性成分為四苯甲基化合物, 不含汞, 甲醛, 苯酚, 醇類, 無毒, 可生物降解。噴一噴，*預防支原體、細菌及病毒等的感染。 |
Incuwater-Clean(A5219) | 用于CO2培養箱內保持空氣濕度的水源消毒，細胞培養箱是細胞實驗室支原體污染中zui容易進行交叉污染的地方,AppliChem了專業針對CO2培養箱水源抗支原體污染的產品.100X即用型溶液供您直接稀釋使用。 |
Aquabator-Clean(A5225) | 細胞實驗室細胞培養過程中使用的各種水箱, 及清洗用水池等地是支原體污染中zui難處理的地方,AppliChem了專業針對水池抗支原體污染的系列產品. 用于水浴消毒，有效防止各類污染 |
目前，有專門做支原體檢測、預防和清除的試劑盒。素有小Sigma之稱的歐洲生化試劑品牌AppliChem推出的Myco系列包含了一整套的支原體解決方案，其支原體檢測試劑盒（PCR Mycoplasma Test Kit）采用保守支原體特殊的序列引物，通過PCR即能快速鑒定細胞是否感染有支原體。該試劑盒提供陽性對照，采用通用性的PCR Mix方案，簡單快捷。另外，配合Myco系列產品的支原體消毒劑和支原體清除試劑，可以盡快發現并清除支原體的污染。
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