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無血清培養
閱讀：1528發布時間：2016-1-29
無血清培養基
(serum
free
medium,SFM)
:
是不需要添加血清就可以維持細胞
在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。
但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白
組分。
雖然基礎培養基加少量血清所配制的*培養基可以滿足大部分細胞培養
的要求，
但對有些實驗卻不適合，
如觀察一種生長因子對某種細胞的作用，
這時
需要排除其他生長因子的干擾作用。
而血清中可能含有各種生長因子；
又如需要
測定某種細胞在培養過程中分泌某種物質
（抗體、
生長因子）
的能力；
或者要大
規模的培養某種細胞，以獲得它們的分泌產物。
無血清培養基的基本配方
:
基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。
用
于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養時，多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長；
而當其在無血清、
無蛋白培養基中生長時，
由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子
如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細胞往往以懸浮形式生長。
添加組分
:
1.
促貼壁物質：許多細胞必須貼壁才能生長，這種情況下無血清培養基中一定
要添加促貼壁和擴展因子，
一般為細胞外基質，
如纖連蛋白、
層粘連蛋白等。
它
們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，
對許多細胞的繁殖和分
化，
起著重要作用。
纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，
這些細胞
包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、
CHO
細
胞、成肌細胞等。
2.
促生長因子及激素：針對不同細胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細胞
生長、維持細胞功能的重要物質，有些激素是許多細胞*的，如胰島素。
3.
酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在基中
*須含酶抑制劑，
以終止酶的消化作用，
達到保護細胞的目的。
zui常用的
是大豆胰酶；抑制劑。
4.
結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添
加比較大，
可增加培養基的粘度，
保護細胞免受機械損傷。
許多旋轉式培養的無
血清培養基都含有牛血清白蛋白。
5.
微量元素：硒是zui常見的。
基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養基加少量血清所配制的*培養基可以滿足大部分細胞培養的要求，但對有些實驗卻不適合，如觀察一種生長因子對某種細胞的作用，這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子；又如需要測定某種細胞在培養過程中分泌某種物質（抗體、生長因子）的能力；或者要大規模的培養某種細胞，以獲得它們的分泌產物。 基的基本配方:基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。 用于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養時，多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長；而當其在無血清、無蛋白培養基中生長時，由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細胞往往以懸浮形式生長。添加組分: 1. 促貼壁物質：許多細胞必須貼壁才能生長，這種情況下基中一定要添加促貼壁和擴展因子，一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。 2. 促生長因子及激素：針對不同細胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些激素是許多細胞*的，如胰島素。 3. 酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在基中*須含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。zui常用的是大豆胰酶；抑制劑。 4. 結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加比較大，可增加培養基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的基都含有牛血清白蛋白。 5. 微量元素：硒是zui常見的。
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