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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
D2700-50 | 糞便基因組DNA提取試劑盒 | 50T | 400.00 |
D2700-50 | 糞便基因組DNA提取試劑盒 | 100T | 700.00 |
Solarbio-糞便基因組DNA提取試劑盒
本試劑盒適合于從各種糞便中提取微生物DNA。對糞便中各種細(xì)菌、真菌有很好裂解效果,大限度的保留了微生物DNA的多態(tài)性。
使用本試劑盒提取的DNA產(chǎn)量大、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR 、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實驗。
操作步驟: 使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。
1、稱取糞便樣本0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成細(xì)粉末,加入450ul 溶液A 震蕩混勻。
* 也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管(建議使用 2ml 圓底管),加入 450ul 溶液 A 劇烈震蕩混勻1-2min 沒有固體塊。使用液氮研磨效果佳。
2、加入50ul 溶液B 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩),65℃水浴6min,每2min充分顛倒混勻一次。
3、加入100ul 溶液C 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩),12000 rpm離心10min 。
4、將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管,12000rpm離心2min 。
5、在吸附柱中加入200ul 溶液D ,將離心后的上清加入到帶有溶液D 的吸附柱中,用移液器吹吸幾次混勻,12000 rpm離心1min。
6、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱( 必須),12000 rpm離心1min。
7、倒掉收集管中的廢液,在吸附柱中加入漂洗液500ul,12000 rpm離心1min。
8、倒掉收集管中的廢液,重復(fù)步驟7 兩次(共漂洗三次)。
9、倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管,12000 rpm離心2min 。
10、拿出吸附柱在室溫干燥數(shù)分鐘( 因季節(jié)及氣候等因素不等),或50℃干燥1min。
11、將吸附柱放入一個新的離心管中,加入50-100ul 洗脫液(65 ℃預(yù)熱),12000 rpm離心1min。
12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,12000 rpm離心1min。離心管中即為糞便微生物DNA 溶液。
Solarbio-糞便基因組DNA提取試劑盒
注意事項:
1、新鮮的糞便樣本會得到更高的產(chǎn)率,不同樣本在采樣前應(yīng)先查閱相應(yīng)的佳保存條件。
2、若溶液中出現(xiàn)渾濁可在37℃水浴中溶解片刻清澈,不會影響結(jié)果。
3、在需要吸取上清液的步驟中應(yīng)避免吸到沉淀,否則會堵塞吸附柱,并影響產(chǎn)物純度。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul ,體積過小會影響回收效率;建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液,用水洗脫也會損失部分產(chǎn)物;DNA應(yīng)保存在-20 ℃避免反復(fù)凍融,以防降解。
5、液體試劑避免接觸皮膚,若意外接觸應(yīng)立即使用大量清水沖洗。
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