目錄:北京索萊寶科技有限公司>>層析介質(蛋白純化)>>葡聚糖凝膠>> S8170-25葡聚糖凝膠G-100
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25g |
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貨號 | S8170 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。 |
有效期 | 6年 |
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英文名稱 | Sephadex G-100 medium |
CAS | 9050-94-6 |
儲存條件 | RT |
外觀(性狀) | 白色粉末 |
單位 | 瓶 |
說明:分離試劑,層析介質。
葡聚糖凝膠G-100
化學和物理性質:
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。 G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。 葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。
葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要*分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。 另外,粗級也可用于批量工藝。
化學穩(wěn)定性:
葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學降解)。 它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的,在強酸中凝膠骨架的糖昔鍵被水解。 長期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應避免使用。
物理穩(wěn)定性:
葡聚糖疑膠并不熔融,可以在濕態(tài)、中性PH進行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分鐘而不影響它的色譜性質。 干態(tài)的凝膠加熱120℃以上將開始焦糖化。 葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯(lián)度。
使用方法:
1. 葡聚糖凝膠預處理:
在室溫下,將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,或者用熱水浸泡(不建議煮沸)少1小時直充分溶脹,凝膠體積不再變化。
注:在溶脹前,加入蒸餾水攪拌后使其自然沉降,沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多,需要重復多次漂洗將其除去,防止層析時阻塞凝膠柱,影響流速。
2. 裝柱:
將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內產(chǎn)生氣泡或斷層; 裝柱要均勻,可在凝膠耐受的操作壓下裝柱,裝好的凝膠柱可以檢測柱效,檢測過濾柱裝填是否合格。
凝膠層析分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度:分級分離時,一般需要 100cm 左右長的層析柱,柱高與直徑之比為 20:1-100:1,柱高過高時,凝膠擠壓變形阻塞會引起較大的反壓,應當盡可能避免;分組分離(例如脫鹽)時用短柱,柱高控制在40-50cm 以下,柱高與直徑的比約為 5:1-10:1。
3. 平衡:
上樣前用平衡液平衡層析柱少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
4. 上樣:
分級分離時上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積。
樣品溶液如有雜質或沉淀應過濾或離心除去,樣品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
5. 洗脫方法:
可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;
6. 在位清洗(CIP)
凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。 方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個柱體積,再以少三個柱體積平衡緩沖液再生。
7. 保存
凝膠柱暫時不用,可將其回收,一般方法是將凝膠用水沖洗干凈濾干,可加入0.02%防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生長。
葡聚糖凝膠G-100
參考文獻:
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