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詳細介紹
QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for E. coli
QCdetect™ 殘留DNA檢測試劑盒，大腸桿菌用
本產品是使用qPCR法（探針法）定量大腸桿菌來源基因組DNA的試劑盒。
推薦用于生物制藥的質量管理以及生產工藝開發中的宿主細胞來源殘留DNA檢測。
◆特點
● 檢測下限：≥0.003 pg/test
● 定量下限：≥0.03 pg/test
● 高線性的標準曲線
● 批次間差異小，再現性高
● 使用預混合緩沖液，操作簡單
◆檢測波長
● E. coli gDNA 520 nm（例：FAM）
● Internal Control 555 nm（例：HEX）
※Internal Control為非天然的合成DNA。
◆試劑盒組成
1×PCR Master Mix——2×1 mL
DNA Dilution Buffer (DDB) ——1×10 mL
E. coli Control DNA——1×40 μL
◆應用實例
標準曲線
使用本試劑盒對0.0003 pg~30,000 pg范圍內的大腸桿菌來源gDNA進行qPCR檢測，并制備標準曲線（n=3）。
即使是0.003 pg~30,000 pg這一大范圍的濃度內，也能獲得高線性的標準曲線。 |
pg/well | 30000 | 3000 | 300 | 30 | 3 | 0.3 | 0.03 | 0.003 | 0.0003 |
Ct | 15.655 | 19.011 | 22.335 | 25.709 | 28.932 | 31.941 | 33.825 | 37.731 | N.D |
15.393 | 18.976 | 22.414 | 25.675 | 28.875 | 31.684 | 34.866 | 38.012 | ||
15.713 | 19.091 | 22.400 | 25.696 | 28.945 | 31.657 | 34.507 | N.D | ||
Average Ct | 15.587 | 19.026 | 22.383 | 25.693 | 28.917 | 31.760 | 34.399 | 37.872 | |
S.E | 0.1707 | 0.0593 | 0.0418 | 0.017 | 0.0371 | 0.1566 | 0.5292 | 0.1989 |
DNA片段的檢測
為了測試該產品能否檢測大腸桿菌gDNA，通過超聲處理使大腸桿菌 gDNA片段化，并使用本試劑盒進行檢測。
即使是檢測片段gDNA，與檢測完整gDNA相比，也有著相同的檢測靈敏度。低濃度的gDNA中也沒有發現靈敏度的下降。 |
高濃度蛋白樣品的應用示例 —配合使用殘留DNA提取/試劑盒（碘/化鈉法） —
向含有人血漿來源γ-球蛋白（75 mg/mL）的樣品中分別添加0.1、1、10 ng/mL的大腸桿菌gDNA，使用殘留DNA提取/試劑盒（碘/化鈉法）提取DNA。然后，使用本產品定量所得DNA，計算加標回收率。
DNA添加量 | 0.1 ng/mL | 1 ng/mL | 10 ng/mL |
檢測系統（PCR反應）中的DNA添加量 | 1 pg | 10 pg | 100 pg |
回收率（平均） | 96.9% | 85.7% | 86.9% |
SD | 0.013 | 0.67 | 1.4 |
CV% | 1.3% | 7.8% | 1.6% |
Detection of E. coli-derived genomic DNA | Detecting Internal Control |
|
|
結果顯示，即使是含有高濃度蛋白的樣品，大腸桿菌gDNA也有著高回收率。 |
◆產品列表
產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 |
290-85301 | QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for E. coli QCdetect™ 殘留DNA檢測試劑盒，大腸桿菌用 | 100 tests |
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