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一種新型的實時細胞分析系統來檢測病毒導致的細胞病變以及中和抗體對2009年的H1N1病毒的效力
RTCA系統是由四個部件組成:一個電子傳感器、一個機械裝置、E-plate、一個軟件控制單元。機械裝置放在組織培養箱中,能夠利用電子傳感器檢測E-plate上每個孔的電阻。在控制軟件的控制之下,CI是基于電子的阻抗,是細胞生長狀況的代表。為了檢測實時分析細胞的擴增情況。
為了獲得背景值,我們首先添加50ul的細胞培養基到96孔E-plate的每一個孔中,然后將每100ul培養基含有2倍濃度的MDCK細胞(稀釋梯度從4.0X104到2.5X103)接種到E-plate。將包含細胞的96孔E-PLATE放到室溫孵育30min,然后放到位于培養箱中的RTCA SP/MP裝置中,細胞值每15min自動檢測一次。為了檢測*的TPCK-trypsin濃度,我們做了一個將細胞放在含有TPCK-trypsinDMEM培養基中培養的實驗,當細胞達到預期時,將
E-plate從RTCA系統中拿出,用DMEM培養基沖洗兩次。然后添加150ul的包含有TPCK-trypsin的MEM培養基(終濃度為10–0.31 mg/mL)。將E-PLATE立刻放到裝置中,繼續檢測CI值
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