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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌PeproTech
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2015-09-25 09:53:57瀏覽次數(shù):511次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒的對(duì)照說明
1.封閉時(shí)間改用37度2h,是4度24h
2.洗板改成5次以上
以上為了保證減少非特異性吸附造成的顯色,影響對(duì)結(jié)果的判斷和分析。
結(jié)果顯示:1:10、1:100、1:200、1:400的陰、陽(yáng)血清均隨抗原呈現(xiàn)剃度變化。
陽(yáng)性血清呈梯度變化是可以理解的,但陰性血清不該這么明顯,原因有二:a.包被抗原量不足,大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒封閉不夠充分,導(dǎo)致板條仍有未封閉的位點(diǎn),可以和酶標(biāo)抗體結(jié)合,自然包被抗原量越多,位點(diǎn)越少,則顯色越弱。b.陰性血清稀釋度過低,導(dǎo)致仍存在非特異的結(jié)合,在封閉*的情況下,要保證陰性血清OD值低,根據(jù)具體情況可以稀釋到1000倍或以上都可以。
抗原空白對(duì)照背景低,但一抗空白對(duì)照背景高,甚至比陰性血清OD值高。
這點(diǎn)用封閉不*比較好解釋,陰性血清在這里相當(dāng)于起了一個(gè)封閉作用,酶標(biāo)抗體結(jié)合少了,顯色自然低了。
大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒另外1:10稀釋的陰性血清和陽(yáng)性血清OD值相差較大,這與報(bào)道較多的1:100稀釋效果好有些出入,不知是否可以用于以后檢測(cè)時(shí)的稀釋倍數(shù)??以上原因是否與包被抗原未進(jìn)行較高提純以及封閉有關(guān)?
OD值相差較大,但首先要看陰性對(duì)照的本底如何(較空白空如何)?如果本底高,是會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響的。這里需要找出稀釋度。
大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒抗原的提純是取決于抗體特異性的,如果所使用的為單抗,對(duì)抗原純度要求可以不高,但是如果是多抗,那么抗原不純將容易引起非特異性的顯色。
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