欧美日韩色视频,欧美亚洲日韩,久久亚洲国产

合肥恩派爾貿(mào)易有限公司

查看電話 在線咨詢

立即詢價(jià)

您提交后，專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)

點(diǎn)擊提交代表您同意《用戶服務(wù)協(xié)議》《隱私政策》

克隆感受態(tài)細(xì)胞在操作時(shí)有哪些注意事項(xiàng)

閱讀：566 發(fā)布時(shí)間：2024-3-20

Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而來(lái)，是目前生長(zhǎng)速度較快的感受態(tài)細(xì)胞之一，在平板上9h可見(jiàn)克隆，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；重組酶缺陷型 (recA1398)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；lacZ M15的存在使Mach1-T1可用于藍(lán)、白斑篩選；tonA突變賦予Mach1-T1菌株對(duì)噬菌體T1和T5的抗性。Mach1-T1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>5x108 cfu/μg DNA。

注意事項(xiàng)：

1、感受態(tài)細(xì)胞建議在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

2、混入目的DNA時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3、轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。

操作說(shuō)明：

1.Mach1-T1感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，待菌塊融化，加入目的 DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置 25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌2YT或LB培養(yǎng)基，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃至少至少13h。

精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

克隆感受態(tài)細(xì)胞在操作時(shí)有哪些注意事項(xiàng)

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示