目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細胞>>克隆感受態(tài)細胞 非電擊>> XL2-BlueChemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50支100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ABG010-50 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 細胞培養(yǎng) |
XL2-Blue Chemically Competent Cell
基因型：
TetRΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIqlacZM15Tn10(TetR)AmyCamR}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1
簡要說明：
XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株，為Hte(hightransformation efficiency)基因型，Hte是Stratagene開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型，已成功應用于40kd質(zhì)粒的構建。Hte使得XL2-Blue適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構建。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdSMR突變導致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。 lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素和LU霉素抗性。High5TM系列XL2-Blue感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。
操作說明：
1.XL2-Blue感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少14h。
注意事項：
1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
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