血清作為細胞常用的天然培養基被廣泛的應用于細胞培養中,因此血清的好壞直接影響到細胞的優劣,今天就給大家介紹下如果選擇一款適合自己的血清。
今天主要介紹的是牛血清。牛血清可分為培養較難養的細胞和干細胞,而新生牛血清通常適用于比較好養的細胞,特別用于病毒疫苗的工業生產以及廣泛的科研領域。新冠影響下疫苗生成用到的新生牛血清激增,選對培養的血清非常重要。
在實際應用中,常需要確定牛血清的濃度。常用濃度為5%~20%,也有用更低濃度的牛血清,這主要依賴于所用的人工合成培養基的類型、組成和營養程度。如果合成培養基的營養較豐富,那么可適當降低牛血清的濃度。它也依賴于所培養的細胞類型和培養的目的。下面以水牛卵母細胞為例。
在2008年,廣西大學等單位曾報道了不同濃度牛血清和白蛋白對水牛卵母細胞體外成熟的影響。卵母細胞的體外成熟是胚胎體外生產技術中的關鍵環節。
研究人員將經卵母細胞清洗2--3遍后,放入預先平衡過的不同濃度的牛血清(ECS,FCS,注:ECS為發情牛血清)及牛血清白蛋白(BSA)的成熟培養液中,其中對照組采用基礎培養液;并放入39℃、含5%CO及飽和濕度的培養箱內培養。基礎培養液為TCM199中加入一定量的激素(LH,FSH,雌二醇)。培養方式為微滴培養法,在60mm培養皿中作12~16個滴,每滴放30--40枚卵丘一卵母細胞復合體,并在培養液滴上面覆蓋石蠟油。
研究人員觀察了在基礎培養液中添加不同牛血清及其濃度分別0(對照),10%ECS,20%ECS,10%FCS,20%FCS對水牛卵母細胞體外成熟的影響。結果顯示:10%ECS,20%ECS,10%FCS組的細胞成熟度顯著高于對照組,又以10%ECS組為突出。隨著FCS血清濃度的增加,成熟度逐漸提高,但無顯著差異。作者認為,添加血清是必要的,但不需太高的濃度。