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h22小鼠腹水肝癌細胞

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  • 所在地 杭州市
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更新時間:2024/07/28 15:47:08瀏覽次數:642

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產品簡介

供貨周期 現貨
h22小鼠腹水肝癌細胞
該細胞公司*,培養狀態下的,現貨一周供應,我公司可100%保障該細胞的質量,代數年輕活性好,不含有細菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體 。

詳細介紹

h22小鼠腹水肝癌細胞

 

細胞縮寫:    H22細胞

 細胞名稱:    H22(小鼠腹水肝癌細胞)

 詳細背景:    該細胞系分離自小鼠腹水,由大連醫科學院建立。

 細胞來源:    細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系

    "購買細胞注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養過夜,隔天再取出觀察。細胞系此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通交流。"    P4

    規格:    復蘇T25培養瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)

    細胞規格:    1*10(5)/ml——1*10(6)/ml

    安全水平:    1

    細胞種屬:    小鼠

    組織來源:   腹水 肝癌

    細胞形態:    淋巴母細胞

    細胞特性:    懸浮

    細胞融合度:    95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

    細胞:    細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

h22小鼠腹水肝癌細胞

 

 操作步驟:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

 2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
     1. 
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
     2.  1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。     
     3. 
 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加1-2mL 培養液后吹勻。
     4. 將細胞懸液按 1比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
 3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

 注意事項:

1.動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態差,很多時候是傳代的原因。
3.有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措。
3.要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,細胞房的實驗穿插進行,可以節省很多時間,也不會耽誤別人的實驗。
4.個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,zui近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟。
5.細胞房不能進去太多人,避免相互干擾。

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